Kvalitatívna analýza hepatitídy C

Zanechajte komentár 9 080

Kvalitatívna analýza polymerázovej reťazovej reakcie - PCR pre hepatitídu C určuje prítomnosť alebo neprítomnosť HCV v tele. V laboratórnych podmienkach sa študuje štruktúra RNA, ktorá zahŕňa vírus. V prípade detekcie vírusu C je potrebné podstúpiť liečbu, pretože zanedbaný stav pečene spôsobí vážne následky. Vysoká kvalita PCR sa vykonáva aj po zotavení na potvrdenie neprítomnosti protilátok. Pridelené na rutinnú kontrolu. Pri nízkej koncentrácii príčinného činidla v krvi nemôže PCR (kvalitatívna) zistiť nič, pretože diagnostický systém má svoje vlastné prahové hodnoty citlivosti. V prípade počiatočného štádia ochorenia alebo miernej formy sa ultra-diagnostika PCR uskutočňuje na ultra-citlivých zariadeniach.

Čo je RNA vírus?

Termín RNA vírusu hepatitídy C (alebo RNA vírusu hepatitídy C) je samotné ochorenie pečene. Vírus C sa viaže na zdravú bunku tela penetráciou do vnútra. V priebehu času sa šíri po celom tele, je potrebné len dostať sa do krvi. Výsledkom je, že patogén preniká do pečene, spojí sa s bunkami a pracuje tvrdo. Hepatálne bunky (hepatocyty) pracujú pod svojim vplyvom, prechádzajú zmenami a zomierajú. Čím dlhšie je vírus C v pečeni, tým väčší počet buniek zomrie. Postupne sa rozvíjajú nebezpečné choroby, ktoré vedú k zhubnej degenerácii a smrti.

Infekcia pečene s týmto typom vírusu sa nemusí prejavovať zvonka. Po mnoho rokov alebo desaťročia sa infikovaná osoba cíti úplne zdravá a iba náhodná vyšetrenie najčastejšie odhaľuje patológiu. Pri darovaní krvi na hepatitídu sa skúma časť reťazca RNA (ribonukleovej kyseliny), ktorá je súčasťou ľudského génu (DNA). Výsledky laboratórnych testov by sa nemali používať na samošetrenie, pretože to je iba indikátor. Presný obraz a ďalšiu diagnózu lekár určí lepšie.

Po vykonaní: indikácie pre výskum

Pri potvrdení HCV sa uskutočňuje analýza PCR (polymerázová reťazová reakcia). Štúdie PCR pomáhajú nájsť patogénny materiál v štruktúre RNA a predpísať účinnú liečbu. Určené v nasledujúcich prípadoch:

  • detekcia príznakov zápalu pečene;
  • skríningové štúdie na prevenciu;
  • vyšetrovanie osôb v kontakte;
  • diagnostika hepatitídy zmiešaného pôvodu (stanovenie hlavného patogénu);
  • stanovenie úrovne reprodukčnej aktivity vírusu v chronickej forme;
  • cirhóza pečene;
  • na určenie účinnosti predpísanej liečby.
Štúdie PCR sú predpísané lekárom na stanovenie účinnosti liečby hepatitídy.

Existuje kvalitatívna aj kvantitatívna analýza PCR. Kvantitatívna PCR ukazuje percentuálny pomer RNA k vírusovým nosičom v krvi a kvalitatívne naznačuje prítomnosť alebo absenciu vírusu. Pozitívny ukazovateľ kvality (prítomnosť RNA hepatitídy C) tiež potrebuje kvantitatívny výskum. Vysoká koncentrácia pôvodcu hepatitídy C je spojená s rizikom prenosu, teda infekcie iných. Nízke počty sú lepšie liečiteľné. Množstvo RNA vírusov v krvi sa netýka intenzity ochorenia. Analýza PCR sa vykonáva aj v prípade terapie interferónom s cieľom predpísať trvanie a zložitosť liečby.

Vlastnosti vysoko kvalitnej analýzy PCR pre hepatitídu C

Kvalitatívna analýza s indexom polymerázovej reťazovej reakcie je pridelená všetkým pacientom, ktorí majú v krvi protilátky proti hepatitíde C. Tí, ktorí boli chorí a boli zotavený, musia opäť vykonať test. Odporúča sa prejsť testom na hepatitídu B, potom v prípade pozitívneho záveru a na hepatitídu D. Tiež by mala byť vykonaná kvalitatívne analyzovaná reakcia v spojení s inými krvnými testami. Analýzy ukážu kompletný obraz šírenia vírusu.

Z výsledkov testov bude len pozitívny test na hepatitídu C viditeľný alebo negatívny, to znamená prítomnosť alebo neprítomnosť vírusu. Ak je výstup detekovaný, potom je vírus aktívny a je stále aktívny. Označenie "nezistené" označuje neprítomnosť vírusu alebo jeho malé množstvo. S týmto ukazovateľom by sa malo pamätať na to, že analytická citlivosť diagnostických systémov je odlišná a že hepatitída C RNA môže byť stále v krvi, ale v analýze sa to neprejavuje.

Obzvlášť citlivá metóda PCR ultra hepatitída C odhaľuje aj v miernom množstve. Použila sa fluorescenčná hybridizačná štúdia, ktorá je mnohonásobne vyššia ako štandardné PCR systémy. Metóda sa používa v niekoľkých prípadoch:

  • podozrivé skryté formy hepatitídy C;
  • Diagnostika PCR nepotvrdila patogén, ale existujú protilátky;
  • v prípade obnovy;
  • na odhalenie včasnej infekcie.
Späť na obsah

Analýza dekódovania

Dekódovanie PCR HCV ovplyvňuje konečné rozhodnutie pri diagnostike, najmä metódou ultrametód. Hlavnou nevýhodou tejto štúdie je prísne dodržiavanie sterilných podmienok pre vzorku a materiály. Mierna odchýlka niekedy vykazuje nepresné analytické závery, komplikuje diagnostiku a následnú liečbu. Analýza PCR na stanovenie hepatitídy RNA nie vždy s istotou ukazuje obraz choroby, niekedy aj nepresnosti a v oboch smeroch.

Pri diagnostike vírusu hepatitídy sa odporúča použiť komplexné vyšetrenie.

Norma ukazovateľov

Neprítomnosť protilátok JgM proti vírusovej hepatitíde C vo výsledkoch štúdie sa považuje za normu pri analýze polymerázovej reťazovej reakcie. Súčasne zistenia sérologickej analýzy naznačujú prítomnosť protilátok proti vírusu C a to je tiež v normálnom rozmedzí. Kvalitatívna definícia neukazuje intenzitu ochorenia, odhaľuje len pôvodcu hepatitídy C v RNA. Táto analýza sa po liečbe opakuje, aby sa potvrdila skutočná regenerácia.

odchýlky

Ak sú prítomné protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to, že došlo k vzniku infekcie. Choroba súčasne prebieha akútne alebo chronicky, prejavuje sa v rôznych štádiách. Ak sa zaznamená pokles počtu protilátok, analýza bude naznačovať, že výsledky liečby boli dosiahnuté počas regenerácie. V diagnostike sa zistili len veľmi zriedkavé prípady falošných pozitívov. Nachádzajú sa u žien počas tehotenstva a u ľudí s inými infekčnými chorobami.

Náklady na krvné testy a PCR na hepatitídu C

Hepatitída C je zápalová patológia, pri ktorej sú postihnuté pečeňové bunky. Choroba sa vyvíja v dôsledku prenikania vírusu hepatitídy C (HVC) do ľudského tela.

Forma ochorenia môže byť akútna alebo chronická.

Najčastejšie príznaky akútnej formy patológie chýbajú, niekedy choroba sprevádza bolestivé pocity v bruchu, znížené výkony, zvýšená únava, strata chuti do jedla, tmavý odtieň moču, zmena farby výkalov, žltá koža a sliznice, bolesť kĺbov. Takéto príznaky sa obvykle vyskytujú 6-8 týždňov po infekcii, ale môžu sa objaviť po šiestich mesiacoch.

S rozvojom takýchto javov je potrebné kontaktovať lekársku inštitúciu a podrobiť sa komplexnému vyšetreniu celého organizmu. V rámci lekárskej prehliadky sa vykoná krvný test na hepatitídu C.

Dnes s pomocou moderných diagnostických techník možno túto patológiu identifikovať v počiatočnom štádiu vývoja, čo značne zvyšuje šance na úplné vyliečenie choroby.

Na testovanie hepatitídy C sú potrebné nasledujúce skupiny ľudí:

  • ženy v období nosenia dieťaťa;
  • osoby s príznakmi hepatitídy;
  • zdravotnícky personál;
  • potenciálnych darcov orgánov a krvi;
  • drogovo závislých, HIV-infikovaných osôb, promiskuitný intímny život.

Zoznam požadovaných štúdií

Aké testy by som mal urobiť pre hepatitídu C? Ak chcete presne diagnostikovať ochorenie, zistiť jej príčiny a určiť stav parenchýmu pečene, sú potrebné nasledujúce štúdie:

  • všeobecné močové a krvné testy;
  • biochemická analýza krvi;
  • PCR analýza;
  • krvný test na detekciu protilátok proti HVC;
  • krvný test existujúcich protilátok na vlastné pečeňové bunky;
  • biopsia pečene.

Dekódovanie krvných testov na hepatitídu C vykonáva špecialista. Zvážte podrobnejšie všetky metódy výskumu a pochopíme, ktorá analýza hepatitídy C je najpresnejšia.

Všeobecná analýza

Pri vykonávaní všeobecného krvného testu na hepatitídu C môžete vyhodnotiť stav pacienta. Zmeny v krvných parametroch nie sú vnímané ako špecifické príznaky hepatitídy, avšak s touto chorobou existujú také poruchy ako:

  • znížená koncentrácia hemoglobínu, krvných doštičiek a leukocytov;
  • zvyšuje obsah lymfocytov;
  • zrážanie krvi je porušené;
  • rýchlosť sedimentácie erytrocytov (ESR).

Všeobecná analýza moču umožňuje detegovať vo svojom zložení urobelín - pigment žlče, ktorý sa vyskytuje v moči v dôsledku zhoršenej funkcie pečene.

Biochemická analýza

Biochemická analýza krvi pri hepatitíde C umožňuje identifikovať také poruchy ako:

  • zvýšené hladiny pečeňových enzýmov (alanín transamináza - ALT a aspartátaminotransferáza - AST), ktoré vstupujú do krvi po poškodení hepatocytov. V normálnom stave by tieto ukazovatele pre mužov nemali byť vyššie ako 37 IU / l pre ženy - nie vyššie ako 31 IU / l. Zvýšená koncentrácia ALT a AST v asymptomatickej hepatitíde C je často jediným príznakom tejto choroby. Okrem toho sa zvyšuje alkalická fosfatáza glutamyl transpeptidázy (zvyčajne nie vyššia ako 150 IU / l).
  • je prekročený obsah bilirubínu (všeobecný aj priamy) v krvi. Ak hladina žltého pigmentu v sére presiahne 27-34 μmol / l, dochádza k žltačke (až do 80 μmol / l v miernom stave, 86-169 μmol / l - v miernom stave, nad 170 μmol / l - v ťažkej forme).
  • Úroveň albumínu sa znižuje, koncentrácia gama globulínov sa naopak zvyšuje. Gama globulíny sú tvorené imunoglobulínmi - protilátkami, ktoré chránia telo pred choroboplodnými látkami.
  • zvýšená koncentrácia triglyceridov v krvi.

PCR test

Pomocou PCR metódy je možné diagnostikovať pôvodcu ochorenia. Vykonanie tejto analýzy umožňuje detegovať vírus v krvi, aj keď jeho množstvo je minimálne. Analýza PCR pre hepatitídu C umožňuje zistiť existujúcu infekciu v krvi už po 5 dňoch od okamihu infekcie, tj dlho pred objavením sa protilátok.

Ak je výsledok krvného testu na hepatitídu C pomocou PCR pozitívny, indikuje to prítomnosť aktívnej infekcie v tele. Pomocou tejto metódy môžete vykonať kvalitatívnu a kvantitatívnu štúdiu HVC RNA.

V priebehu kvalitatívnej analýzy PCR pre hepatitídu C je možné detegovať existujúci vírus v ľudskom tele.

Tento diagnostický postup sa vykonáva, ak sa v krvi zistí anti-HVC.

Dešifrovanie analýzy hepatitídy C obsahuje informácie, že infekcia bola buď zistená, alebo nezistená v tele. Za normálnych okolností sa v krvi nevyskytujú žiadne patologické látky.

Ak je test na hepatitídu C pozitívny, znamená to, že patogén sa kontinuálne delia a infikujú pečeňové bunky.

Výsledky tejto analýzy môžu byť nespoľahlivé, je možné v nasledujúcich prípadoch:

  • použitý kontaminovaný biomateriál;
  • v prítomnosti heparínu v krvi;
  • v prítomnosti chemických alebo proteínových látok (inhibítorov) v študovanom biomateriáli, ktoré ovplyvňujú prvky PCR.

Kvantitatívna analýza hepatitídy C poskytuje informácie o množstve vírusu obsiahnutého v krvi, teda určuje vírusovú záťaž. Týmto pojmom sa rozumie objem HVC RNA prítomnej v krvi (napríklad v 1 ml). Pri interpretácii kvantitatívnej analýzy hepatitídy C je táto hodnota vyjadrená v digitálnom ekvivalente meranom v IU / ml.

Krv na PCR pre hepatitídu C sa užíva pred terapeutickými opatreniami. Po analýze sa uskutoční 1, 4, 12 a 24 týždňov. Štúdia v 12. týždni je orientačná a vykonáva sa s cieľom posúdiť účinnosť lekárskych postupov.

Ak je test na hepatitídu C počas tehotenstva pozitívny a hodnoty vírusového zaťaženia sú prekročené, riziko prenosu patogénov z chorého matky na dieťa sa zvyšuje niekoľkokrát. Tiež pri zvýšených hodnotách vírusovej záťaže je vykonávanie terapeutických opatrení ťažké.

Podľa prepisu testov na hepatitídu C, ak hodnoty vírusového zaťaženia presahujú 800 000 IU / ml, potom je vysoká. Ak sú hodnoty nižšie ako 400 000 IU / ml, úroveň vírusovej záťaže sa považuje za nízku.

Analýza hepatitídy C pomocou PCR sa považuje za najpresnejšiu a má niekoľko výhod oproti iným výskumným možnostiam, a to:

  • priamu diagnózu pôvodcu ochorenia. Pri vykonávaní tradičných štúdií sa určuje prítomnosťou proteínových markerov, ktoré sú odpadovými produktmi patogénov. To len naznačuje, že infekcia je prítomná v krvi. Pri testovaní na hepatitídu C pomocou PCR je možné určiť typ patogénu nebezpečnej patológie.
  • špecifickosť techniky. Počas tohto postupu sa v biomateriáli určuje jedinečná oblasť DNA, ktorá zodpovedá iba jedinému typu patogénu. To minimalizuje pravdepodobnosť nepravdivých výsledkov.
  • vysoká citlivosť. Pri analýze PCR môžete zistiť minimálne množstvo vírusu. Toto je dôležité, ak sú identifikované podmienene patogénne látky, ktoré predstavujú hrozbu iba vtedy, ak sa ich úroveň zvyšuje.
  • Pri použití tejto techniky v jednej vzorke biomateriálu možno naraz odhaliť niekoľko patogénov.
  • môžu odhaliť skryté infekcie. Okrem toho analýza umožňuje diagnostikovať patogénne mikroorganizmy, ktoré žijú vo vnútri buniek a majú vysokú antigénnu variabilitu.

Ak sú výsledky testov pozitívne, potom sú v biomateriále nájdené stopy vírusu, potom má sieť v organizme infekciu.

Negatívna analýza PCR pre hepatitídu C znamená, že v biomateriáli nie sú stopy infekcie.

Imunologická štúdia

Táto metóda umožňuje identifikovať protilátky proti všetkým typom vírusu hepatitídy, ako aj protilátky proti pečeňovým bunkám vášho tela, ktorých výskyt prispieva k rozvoju autoimunitnej hepatitídy.

Výsledky získané počas štúdie sú relevantné počas 3 mesiacov, potom by ste mali znova darovať krv na hepatitídu C.

Je tiež možné vykonať expresnú štúdiu pomocou špeciálnych testovacích prúžkov. Táto analýza umožňuje stanoviť protilátky proti vírusu C v zložení krvi a slín. Tento postup sa môže uskutočniť nezávisle doma.

Biopsia pečene

Na vykonanie takejto analýzy sa odoberie prvok pečeňového parenchýmu a uskutoční sa histologické vyšetrenie získaného biomateriálu. To vám umožní posúdiť stav tela: identifikovať zápalové, nekrotické ohniská, fázu fibrózy a tak ďalej.

Dnes sa používajú testy, ktoré nahrádzajú histologickú analýzu pečeňového parenchýmu.

Na posúdenie štádia poškodenia pečene a intenzity zápalového procesu sa používajú špecifické biomarkery krvi v krvi. Použitím funkcie FibroTest môžete posúdiť stupeň rastu vláknitého tkaniva.

Pri vykonávaní testu Actitest môžete získať informácie o intenzite patologických procesov v pečeňovom parenchýme. Pomocou Steatototesta môžete diagnostikovať tukové tkanivá pečene a posúdiť rozsah tohto procesu. Fibromax pozostáva zo všetkých vyššie uvedených testov a môže zahŕňať aj ďalšie štúdie.

Príprava na štúdiu

Aké testy sme vykonali pre hepatitídu C a ako sme zistili tento alebo ten typ výskumu. Rovnako dôležité je vedieť, ako sa pripraviť na analýzu.

Na získanie spoľahlivých výsledkov sa odporúča dodržiavať nasledujúce požiadavky:

  • Testy na hepatitídu C sa musia vykonať ráno, na prázdny žalúdok. V poslednej dobe sa potraviny majú konzumovať najmenej 8 hodín pred štúdiom.
  • Biomateriál sa môže zhromažďovať denne alebo večer. V tomto prípade je dôležité, aby medzi posledným jedlom a analýzou prešlo aspoň 5-6 hodín.
  • pred darovaním krvi na hepatitídu C, čaj, káva, džús alebo iné nápoje by mali byť zlikvidované, iba voda je povolená.
  • 48 hodín pred štúdiom je potrebné vylúčiť použitie tukových, vyprážaných potravín a nápojov obsahujúcich alkohol.
  • najmenej hodinu pred analýzou sa musíte zdržať fajčenia.
  • analýza by sa nemala vykonať bezprostredne po ultrazvuku, inštrumentálne vyšetrenie, röntgenové vyšetrenie, masáž alebo fyzioterapia.
  • jeden deň pred uskutočnením štúdie je potrebné vylúčiť použitie liekov a intenzívnu fyzickú aktivitu. Emocionálny stres je tiež kontraindikovaný.
  • Odporúča sa stráviť 15 minút pred vykonaním štúdie v pokojnom stave.

Vykonanie postupu odberu krvi

Kde sa dostanem testy na hepatitídu C? Odber vzoriek biomateriálu pre ďalší výskum sa vykonáva v laboratóriu lekárskej inštitúcie alebo v domácnosti pacienta.

Krv z žily sa užíva nasledovne:

  • pomocou špeciálneho krúžku zabaleného okolo predlaktia pacienta sa zastavuje venózny krvný tok. Vďaka takýmto manipuláciam budú žily vyplnené krvou a budú viditeľné, čo výrazne uľahčí proces vkladania ihly.
  • oblasť kože, v ktorej je ihlica vložená, sa starostlivo ošetrí alkoholom alebo kvapalinou obsahujúcou alkohol.
  • Ihla sa jemne vloží do žily a potom sa k nej pripojí skúmavka, ktorá je špeciálne navrhnutá na zber krvi.
  • Ihneď po vložení ihly do žily sa stláčací postroj vytiahne z ramena pacienta.
  • po zozbieraní objemu krvi potrebného na analýzu je ihla jemne odstránená z žily.
  • v mieste vpichu sa musí aplikovať sterilný bavlnený tampón alebo gázová vložka navlhčená alkoholom.
  • aby sa zabránilo výskytu hematómu, tampón by mal byť stlačený s určitým úsilím proti oblasti vpichu ihly, ohýbať rameno na lakte a držať ho v tejto polohe niekoľko minút. Takéto opatrenia tiež pomôžu rýchlejšie zastaviť krv.

Za predpokladu, že technika vnútornej administrácie je dobrá, je tento postup absolútne bezpečný a nespôsobuje bolestivé pocity.

V zriedkavých prípadoch sa po zberu krvi môžu žily zduriť. Tento jav sa nazýva "flebitída". Kompresia (nie horúca) pomôže vyriešiť problém, mala by sa aplikovať na opuchnuté miesta pokožky niekoľkokrát denne.

Určité problémy sa môžu vyskytnúť aj v prípade poruchy krvácania. Užívanie aspirínu, warfarínu a iných riedidiel krvi môže spôsobiť krvácanie. Preto pred vykonaním analýzy je potrebné odmietnuť užívať akékoľvek lieky. Ak liečbu nemožno zrušiť, mali by ste informovať špecialistu.

Dátumy a ceny

Koľko sa testuje na hepatitídu C? Výsledky krvného testu na hepatitídu možno pripraviť o niekoľko hodín a niekoľko dní (spravidla nie viac ako 8 dní). Trvanie prípravy výsledkov závisí od typu vírusu a zvolenej metódy analýzy. Rýchlejšia je štúdia vykonaná metódou PCR. Výsledky v tomto prípade budú pripravené za pár hodín.

Koľko stojí test na hepatitídu C? V závislosti na klinike a zložitosti štúdie sa cena procedúry môže pohybovať od 400 do 11 000 rubľov.

Mali by ste si uvedomiť, že môže trvať niekoľko týždňov na vytvorenie dostatočného množstva protilátok proti HVC. Preto v počiatočnom štádiu vývoja patológie môže byť výsledok štúdie falošne negatívny.

Navyše je možné získať nespoľahlivé údaje s nízkou kvalitou analýzy a porušovaním podmienok prepravy získaného biomateriálu (vzorky musia byť dodané do laboratória maximálne 2 hodiny po odbere vzoriek krvi).

Ak je výsledok štúdie pozitívny, mali by ste okamžite kontaktovať lekára na infekčné ochorenia. Špecialista vykoná ďalšie vyšetrenie a predpíše príslušnú liečbu.

Vykonanie analýzy PCR pre hepatitídu C a dekódovanie výsledkov

Analýza PCR proti hepatitíde C je štúdia, ktorej hlavným cieľom je identifikovať genetický materiál pôvodcu. Analýza odhaľuje príčinu ochorenia pomocou polymerázovej reťazovej reakcie. Táto diagnóza má vysoký stupeň presnosti, špecifickosť na zistenie prítomnosti alebo prítomnosti vírusovej infekcie.

Podstata diagnózy

Na uskutočnenie PCR analýzy na stanovenie vírusu hepatitídy C od pacienta sa odoberá venózna krv, ktorá potenciálne obsahuje HCV požadovanej vírusu RNA (ribonukleovej kyseliny).

Test PCR na hepatitídu C zahŕňa postup, keď sa do krvných častíc pacienta pridá nasledovné:

  • priméry (krátke umelo syntetizované oblasti potrebného génu);
  • špeciálny enzým (RNA polymeráza).

Po zbere biologického materiálu sa posiela na výskum v laboratóriu. Jedna časť krvi je potrebná na priamu analýzu PCR, druhá je poslaná do štúdie metódou ELISA. Enzým je schopný v krátkom čase zvýšiť počet genetických materiálov vírusu patogénu. Vo zvláštnom prístroji sa vykonáva niekoľko cyklov tepla a chladenia. V záverečnej fáze sa získaný materiál porovná s génmi vírusu a urobí sa záver o prítomnosti alebo neprítomnosti patológie v tele pacienta.

Podstata a analýza PCR v laboratóriu. Filmoval SiberianMedicalLaboratory.

Druhy výskumu

Existujú tri typy diagnostiky, ktoré umožňujú určiť prítomnosť vírusu hepatitídy C v ľudskom tele:

  • genotypu;
  • kvalita;
  • kvantitatívne.

Kvalitatívna metóda

Diagnóza hepatitídy C s kvalitatívnou metódou je použiteľná u pacientov, u ktorých sú v krvnom teste zistené protilátky proti vírusu. V prípade prítomnosti akútnej fázy HCV RNA takéto diagnostické opatrenia umožňujú určiť prítomnosť ochorenia v priebehu 1-2 týždňov po infekcii. Počas tohto obdobia nemusia byť vyvinuté protilátky proti hepatitíde C.

Kvantitatívna metóda

Na stanovenie koncentrácie vírusu v krvných vzorkách sa používa kvantitatívna diagnostická metóda. Takýto test na virémiu (stupeň koncentrácie) umožňuje presne určiť počet jednotiek vírusovej RNA. Konečný výsledok je vyjadrený v príslušnom objeme. Ak hovoríme o kvantitatívnej analýze, ukazovatele sa merajú v 1 ml (1 kubický meter).

Parameter vírusového zaťaženia znamená úroveň infekčnosti choroby, to znamená, že odráža stupeň "infekčnosti" pacienta. V praxi to znamená, že čím vyššia je koncentrácia vírusu v krvi, tým väčšia je pravdepodobnosť, že pacient infikuje iných s hepatitídou C. Kvantitatívny spôsob výskumu tiež umožňuje zistiť kvalitu a účinnosť vykonanej liečby.

genotypu

Genotypizácia odhaľuje mutácie pôvodcu ochorenia. Pred stanovením liečebného plánu sa určí genotyp vírusu: od neho závisí kvalita a trvanie liečby. Napríklad pri liečbe ochorení typu I je účinnosť 60%, v prípade typu II, III - asi 80%.

Výhody PCR analýzy pre hepatitídu

Medzi hlavné výhody postupu patrí:

  1. Možnosť včasnej diagnostiky. PCR analýza je schopná detegovať prítomnosť vírusu v počiatočných štádiách infekcie.
  2. Nízke výsledky chýb. Štúdia biologického zdroja umožňuje diagnostikovať časť genetického materiálu, ktorá je charakteristická len pre jeden typ vírusovej infekcie. Táto okolnosť umožňuje zabrániť falošným diagnostickým výsledkom.
  3. Vysoký stupeň citlivosti. Analýza PCR je schopná detekovať vírus RNA v malých množstvách, čo tiež umožňuje sledovať latentné infekcie v čase.

Indikácie pre

Testovanie na PCR pre hepatitídu C je potrebné, ak je k dispozícii:

  • mať kontakt s chorými, čo by mohlo viesť k infekcii;
  • príznaky cirhózy pečene (zväčšenie sleziny, nezvyčajné zmeny veľkosti pečene, detekcia venózneho plexu na bruchu pod kožou);
  • pozitívne výsledky testu ELISA;
  • zvýšená aktivita AST a ALT (prejavuje sa v biochemickej analýze krvi);
  • potreba kontrolovať vykonávanie antivírusovej liečby;
  • počiatočná fáza liečby pre potrebu stanovenia vírusovej záťaže;
  • uskutočnenie konečnej fázy liečby s cieľom odstrániť prípadné recidívy;
  • prítomnosť hepatitídy B u pacienta na vylúčenie vývoja zmiešaného poškodenia pečene.

Ako sa pripraviť na darcovstvo krvi pre PCR štúdie

Príprava na analýzu PCR obsahuje nasledujúce odporúčania:

  • krv sa užíva ráno;
  • analýza sa vykonáva na prázdny žalúdok, preto je vhodné prestávku medzi posledným jedlom o 8-10 hodinách;
  • niekoľko dní pred diagnózou by sa mali vylúčiť mastné, pikantné a vyprážané potraviny, alkoholické nápoje a fajčenie;
  • jeden deň pred analýzou by sa malo zdržať ťažkej fyzickej námahy, vylúčiť triedy v telocvični alebo v bazéne.

Výsledky analýzy: normy a odchýlky

Samotná analýza nie je dlhá a vysokokvalifikovaný špecialista na hepatológ alebo špecialista na infekčnú chorobu dešifruje výsledky PCR pre hepatitídu C. Na základe výsledkov analýzy je pacient diagnostikovaný.

Na správne dešifrovanie výsledkov prieskumu sa berú do úvahy tieto ukazovatele:

  • biochemická analýza krvi;
  • ultrazvukové údaje;
  • výsledky biopsie.

Interpretácia kvantitatívnej analýzy

Pri získaní výsledkov kvantitatívnej analýzy PCR sa zohľadňujú tieto ukazovatele:

Základné testy na hepatitídu C

Vírusová hepatitída C je vážnym zdravotným a sociálnym problémom. Približne 180 miliónov ľudí na svete trpí touto chorobou, každoročne zomrie 350 000 ľudí. Dlhodobý latentný (asymptomatický) priebeh hepatitídy C vedie k oneskorenej diagnóze. Analýza hepatitídy C sa vykonáva s cieľom diagnostikovať chorobu, diferenciálna diagnostika, s jej pomocou, určiť skôr prenesené ochorenie "stojí". Štúdia sa používa u pacientov so symptómami hepatitídy C, zvýšených hladín pečeňových enzýmov, pri získavaní informácií o predtým prevedenej hepatitíde s nešpecifikovanou etiológiou, u rizikových ľudí a štúdiách skríningu.

Diagnóza hepatitídy C sa uskutočňuje v dvoch fázach:

Etapa 1 Stanovenie prítomnosti protilátok proti vírusu hepatitídy C (anti-HCV) v sére.

Etapa 2 V prítomnosti anti-HCV sa vykoná test na prítomnosť RNA (ribonukleovej kyseliny) pomocou PCR pre hepatitídu C. Test umožňuje identifikovať fázu procesu - "aktívny / neaktívny", aby sa vyriešil problém potreby liečby. Je známe, že asi 30% osôb infikovaných vírusom hepatitídy C sa samo od seba zbavuje infekcie, pretože majú silný imunitný systém a nepotrebujú liečbu. Použitie PCR je určené genotypom vírusu. Rôzne genotypy reagujú odlišne na liečbu.

Stupeň poškodenia pečene pri hepatitíde C sa stanoví pomocou biopsie alebo iných invazívnych a neinvazívnych testov (napríklad fibrotest). Stupeň steatózy pečene určuje steatotesta. Vo všetkých prípadoch by diagnóza hepatitídy C mala byť založená na údajoch z epidemiologického vyšetrenia, klinike choroby a údajoch biochemických krvných testov.

Obr. 1. Závažné účinky vírusovej hepatitídy C - intenzívneho ascitu.

Test na hepatitídu C: anti-HCV

Protilátky proti HCV (anti-HCV) sú špecifické markery infekcie. V tele chorého sú produkované špecifické protilátky na proteíny vírusu hepatitídy C (antigény) - imunoglobulíny triedy IgM a IgG (anti-HCV IgM / IgG).

Ak sa pre protilátky proti vírusu hepatitídy C získa pozitívny výsledok, vykoná sa potvrdzujúci test - stanovenie celkových protilátok proti štrukturálnym a neštrukturálnym proteínom vírusu. Štrukturálne obalové proteíny vírusov E1 a E2 sa produkujú anti-HCV IgM, nukleokapsidovým proteínom C-cor (anti-HCV IgG) a 7 neštrukturálnymi proteínmi - enzýmami NS-anti HCV NS IgG.

Na detekciu protilátok proti vírusu hepatitídy C sa používa enzýmovo viazaný imunosorbentný test (ELISA). Potvrdzovacie testy - RIBA (rekombinantné imunoblotovanie), menej často Inno-Lia (analýza syntetických peptidov) sa používa na potvrdenie (+) výsledkov ELISA.

Anti HCV IgM

  • HCV IgM protilátky sa objavujú v sére 4-6 týždňov po infekcii a rýchlo dosiahnu maximum. Na konci akútneho procesu (po 5 - 6 mesiacoch) sa ich koncentrácia znižuje.
  • Dlhodobá registrácia prítomnosti IgM anti-HCV naznačuje, že hepatitída C získala chronický priebeh.
  • Zvýšenie hladiny IgM v období chronickej hepatitídy C naznačuje opätovnú aktiváciu infekčného procesu.
  • Úroveň IgM imunoglobulínov umožňuje vyhodnotiť účinnosť liečby.

Anti HCV IgG

HCV protilátky IgG sa objavujú v sére pacienta 11 až 12 týždňov po infekcii. Po 5 až 6 mesiacoch sa zaznamenáva vrcholová koncentrácia. Ďalšie protilátky

zostávajú na konštantnej úrovni počas trvania ochorenia v akútnom období a počas obdobia zotavenia.

Celkové protilátky proti vírusu hepatitídy C

Celkové protilátky proti vírusu hepatitídy C (celkom proti HCV) sa používajú na diagnostiku "čerstvých" prípadov ochorenia. Celkové protilátky sú protilátky proti nukleokapsidovému proteínu C - cor (proti HCV IgG) a 7 nonstructural NS proteínovým enzýmom (anti HCV NS IgG) anti HCV NS3, anti HCV NS4 a anti HCV NS5.

Celková protilátok proti vírusu hepatitídy C sa objaví v krvnom sére infikovatelné po 11 - 12 týždňov od začiatku infekcie, dosahuje maximálnu na 5 - 6 mesiacmi a uložených na stálej úrovni počas trvania choroby v akútnej fáze a pre 5 - 9 rokov po období rekonvalescencie,

Každý z typov protilátok má nezávislú diagnostickú hodnotu:

  • AntiHCVC (cor) sú hlavnými indikátormi kontaktu s hepatitídou C.
  • AntiHCVNS3 detegoval jeden z prvých v procese sérokonverzie (produkcia protilátok ako odpoveď na prítomnosť vírusu), indikoval závažnosť infekčného procesu a naznačoval vysoké vírusové zaťaženie. S ich pomocou sa určuje dedičná hepatitída C u pacientov, ktorí nemajú podozrenie, že majú infekciu. Dlhodobá prítomnosť anti-HCV NS3 v sére naznačuje vysoké riziko chronicity procesu.
  • AntiHCVNS4 naznačuje, že infekčný proces má dlhý priebeh. Úroveň titrov protilátok sa môže posudzovať podľa stupňa poškodenia pečene.
  • AntiHCVNS5 indikujú prítomnosť vírusovej RNA. Ich objav v akútnom období je predchodcom chronicity procesu. Vysoké titre protilátok na pozadí liečby naznačujú, že pacient nereaguje na liečbu.
  • AntiHCVNS4 a antiHCVNS5. Tento typ protilátok sa objavuje v neskorých štádiách vývoja hepatitídy. Ich zníženie naznačuje vznik remisie infekčného procesu. Po liečbe sa titre anti-HCV NS4 a anti-HCV NS5 znížili v priebehu 8 až 10 rokov. Tento typ protilátky nechráni pred reinfekciou.

Obr. 2. makrodrug pečene. Cirhóza pečene pri hepatitíde C.

Dekódová analýza pre hepatitídu C

Neprítomnosť protilátok proti vírusu hepatitídy C je označená výrazom "norma". To však neznamená vždy neprítomnosť ochorenia u ľudí. Preto sa zaznamenáva neprítomnosť protilátok v krvi infikovanej osoby, kým sa neobjavia v krvi - až 6 mesiacov od okamihu infekcie (v priemere 12 týždňov). Obdobie neprítomnosti protilátok v krvi infikovanej osoby sa nazýva "sérologické okno". Testovacie systémy tretej generácie (ELISA-3) majú vysokú špecifickosť (až 99,7%). Približne 0,3% predstavovalo falošné pozitívne výsledky.

Prítomnosť anti-HCV indikuje aktuálnu infekciu alebo infekciu v minulosti.

  • Detekcia protilátok IgM a anti-HCV Cor Cor IgG, zvýšenie titrov anti-HCV IgG a (+) PCR výsledky v prítomnosti klinických a laboratórnych príznakov akútnej hepatitídy naznačujú akútne obdobie ochorenia.
  • Detekcia protilátok proti IgM, anti-HCV Coré IgG, anti-HCV NS IgG a (+) PCR vedie k prítomnosti klinických a laboratórnych príznakov hepatitídy, čo naznačuje reaktiváciu chronickej hepatitídy C.
  • Detekcia anti-HCV IgG IgG a anti-HCV NS IgG pri absencii klinických a laboratórnych príznakov hepatitídy a negatívny výsledok PCR naznačuje, že pacient má chronickú hepatitídu v latentnej fáze.

Obr. 3. Macrodrug pečene. Primárna rakovina pečene. Jedným z dôvodov rozvoja onkológie je cirhóza pečene, ktorá vznikla na pozadí chronickej hepatitídy C.

PCR analýza pre hepatitídu C

Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je "zlatým štandardom" pre diagnózu vírusovej hepatitídy C. Vysoká citlivosť testu umožňuje detegovať genetický materiál vírusov (RNA) aj v prípade, že existuje len málo z nich v študovanom materiáli. PCR je schopný detekovať vírusy RNA dlho pred vznikom protilátok v sére, ale nie skôr ako od 5. dňa od okamihu infekcie. Keď je choroba detekovaná pomocou PCR, vírusy RNA sa detegujú nielen v sére, ale aj v pečeňových biopatoch.

  • Polymerázová reťazová reakcia umožňuje určiť prítomnosť alebo neprítomnosť vírusov hepatitídy C v krvi a rozhodnúť o začiatku liečby. Je známe, že až 30% pacientov sa samých zbaví infekcie, pretože majú silný imunitný systém a nepotrebujú liečbu.
  • Na monitorovanie účinnosti liečby sa používa hepatitída C PCR.
  • PCR sa používa v neprítomnosti protilátok v krvi, ale v prítomnosti silných podozrení na hepatitídu C (zvýšené hladiny alkalickej fosfatázy, celkový bilirubín, 2-násobný nadbytok pečeňových enzýmov AST a ALT).
  • PCR analýza hepatitídy C sa používa na kontrolu intrauterinného prenosu vírusov hepatitídy.

Vírusová záťaž hepatitídy C

Pomocou PCR analýzy je možné určiť nielen prítomnosť vírusovej RNA v krvi - kvalitatívnu analýzu (detegovanú / nezistiteľnú), ale ich počet - vírusové zaťaženie (počet jednotiek vírusovej RNA v 1 ml krvi). Kvantitatívny indikátor PCR sa používa na monitorovanie účinnosti liečby hepatitídy C.

Metódy použité pre PCR majú rozdielnu citlivosť. V Ruskej federácii sa podľa metodických odporúčaní z roku 2014 odporúča použiť metódy, ktoré majú citlivosť 25 IU / ml alebo menej. Podľa odporúčaní Európskej asociácie pre štúdium pečene v roku 2015 sa navrhuje použiť metódy na stanovenie vírusovej RNA s citlivosťou 15 IU / ml alebo nižšou.

V závislosti od citlivosti testovacieho systému pacient dostane jeden alebo druhý výsledok štúdie:

  • Minimálna citlivosť analyzátora COBAS AMPLICOR je 600 IU / ml (analyzátor staršej generácie).
  • Minimálna citlivosť analyzátora HCB-TEST COBAS AMPLICOR je 50 IU / ml, čo je 100 kópií na 1 ml.
  • Minimálna citlivosť analyzátora HCV RealBest RNA je 15 IU / ml, čo je 38 kópií na ml (zahrnuté do skupiny moderných testovacích systémov). Špecifickosť týchto analyzátorov je 100%. S ich pomocou sa zisťujú RNA vírusov hepatitídy C podtypov 1a a 1b, 2a, 2b, 2c a 2i, 3, 4, 5a a 6.

Ak existujú kópie RNA pod hranicou citlivosti tohto analyzátora, pacient dostane odpoveď "nezistená".

Obr. 4. Príklad PCR analýzy (kvantitatívny test). Vírusová záťaž je určená pre hepatitídu C.

Interpretácia výsledkov analýzy PCR pre hepatitídu C

  • Neprítomnosť vírusu RNA indikuje neprítomnosť infekcie.
  • Neprítomnosť RNA proti prítomnosti protilátok v krvi naznačuje vymiznutie vírusu hepatitídy C pod vplyvom liečby alebo seba-hojenia.
  • V niektorých prípadoch je vírus prítomný v krvi, ale na podprahových úrovniach, keď jeho koncentrácia nie je zachytená analyzátormi. Takíto pacienti sú z hľadiska infekcie nebezpeční.
  • Detekcia vírusu RNA počas 6 po sebe nasledujúcich mesiacov u pacientov s akútnou hepatitídou C naznačuje, že ochorenie prekonalo chronický priebeh.
  • Zníženie vírusovej RNA počas liečby poukazuje na účinnosť terapie a naopak.

Obr. 5. Mastná hepatóza. Jednou z príčin poškodenia pečene je vírusová hepatitída C.

Základné biochemické krvné testy na hepatitídu C

Biochemické krvné testy pomáhajú pri stanovení funkčného stavu mnohých ľudských orgánov a systémov.

Pečeňové enzýmy ALT a AST

Hepatálne enzýmy sa syntetizujú intracelulárne. Podieľajú sa na syntéze aminokyselín. Veľa z nich sa nachádza v bunkách pečene, srdca, obličiek a kostrových svalov. Pri porážke orgánov (porušenie integrity bunkových membrán) enzýmy vstupujú do krvi, kde sa ich hladina zvyšuje. Zvýšené hladiny enzýmov sú zaznamenané pri porážke (lýza, deštrukcia) pečeňových buniek, infarktu myokardu a iných ochorení. Čím je vyššia hladina transamináz v sére, tým viac buniek bolo zničených. ALT prevažuje v pečeňových bunkách, AST - v bunkách myokardu. S deštrukciou pečeňových buniek sa hladina ALT zvyšuje 1,5 - 2 krát. Pri zničení buniek myokardu sa hladina AST zvyšuje o 8 až 10 krát.

Pri diagnostikovaní chronickej vírusovej hepatitídy je potrebné venovať pozornosť pomeru AST / ALT (koeficient de Ritis). Prebytok AST nad ALT indikuje poškodenie pečeňových buniek.

  • Norma AST pre mužov je až 41 jednotiek / l, ženy - do 35 jednotiek / l, deti staršie ako 12 rokov - až 45 jednotiek / l.
  • Norma ALT pre mužov je až 45 jednotiek / l, ženy - až 34 jednotiek / l, deti vo veku 12 rokov a staršie - až 39 jednotiek / l.
  • Normálne (u zdravých ľudí) sa pomer AST / ALT pohybuje od 0,91 do 1,75.

bilirubín

Bilirubín je produkt rozkladu hemoglobínu. Bilirubín v krvi sa nachádza vo forme nepriamej (až 96%) a priamej (4%). Proces rozkladu tejto látky sa vyskytuje hlavne v bunkách pečene, kde sa vylučuje z tela žlčou. S deštrukciou pečeňových buniek sa hladina bilirubínu v sére zvyšuje. Normálne je celkový obsah bilirubínu menší ako 3,4 - 21,0 μmol / l. Pri hladine 30-35 μmol / l a vyššej, bilirubín preniká do tkanív, vďaka čomu sa koža a skléra dostávajú do žltačky.

Obr. 6. Keď hepatitída C v krvi zvyšuje hladinu bilirubínu. Látka preniká do tkanív, čo je dôvod, prečo sa pokožka a skléra stali žltačkou.

Diagnostika PCR pre hepatitídu C

Hepatitída C je zápal pečeňových buniek, ku ktorému dochádza v dôsledku infekcie vírusom HCV (hepatitída C) v kontakte s krvou infikovanej osoby. Genetický kód flavivírusu HCV nesie molekula RNA (ribonukleová kyselina) obsiahnutá v štruktúre vírusu. Tento život ohrozujúci jav sa vyznačuje tajomstvom v počiatočnej fáze patológie. Časový interval medzi infekciou a nástupom príznakov (reakcia imunitného systému) môže byť od jedného mesiaca do šiestich mesiacov. Zvyčajne ide o chronickú chorobu, ktorá je ťažké liečiť.

Moderná medicína vám umožňuje diagnostikovať patológiu s menším poškodením pečene. Medzi najbežnejšie a účinné diagnostické metódy patrí analýza PCR. Zvážte v tomto článku, čo to je a aké druhy existujú.

Aká je štúdia

PCR analýza hepatitídy C je laboratórne vyšetrenie, ktoré detekuje flavirus, genetický materiál ribonukleovej kyseliny (RNA). Určuje počet molekúl RNA v krvi, kvalitu biologického materiálu, genetický typ vírusu HCV.

Metóda PCR pre hepatitídu C umožňuje detegovať minimálne množstvo flaviru pred tvorbou protilátok spravidla krátko po infekcii.

Štúdia sa často označuje ako analýza RNA, pretože detekuje častice ribonukleovej kyseliny s veľkosťou 30-60 nm obsiahnuté vo flavavírusu.

Štúdia sa vykonáva takto: na prázdny žalúdok pacient dáva krv z žily, ktorá sa potom testuje rôznymi spôsobmi:

  • PCR v reálnom čase sa uskutočňuje uzatvoreným automatizovaným spôsobom a má nižšiu hranicu na detekciu vírusov RNA 15 IU / ml;
  • COBAS AMPLICOR s citlivosťou 50-100 IU / ml.

Čím vyšší je prah citlivosti diagnostického postupu, tým väčšia je pravdepodobnosť detekcie najnižšieho obsahu vírusu v skúmanom biologickom materiáli.

Aké typy analýz sa používajú

Analýza, ktorá sa úspešne používa niekoľko desaťročí, sa nazýva PCR hepatitída a dá sa zistiť pomerne ľahko a rýchlo. V medicíne existujú dva spôsoby reakcie, ktoré sa navzájom zásadne líšia:

  • kvalitatívna metóda odhaľuje prítomnosť genetického zdroja určitého vírusu v biologickom materiáli;
  • kvantitatívna analýza meria počet genetických látok, čo umožňuje určiť stupeň patológie alebo zhodnotiť účinnosť terapeutického kurzu;
  • genotypizácia určuje typ vírusu prítomného v tele.

Vo všeobecnosti krvný test pomáha identifikovať povahu virémie a genetického typu patogénu. Spravidla sa štúdia uskutočňuje 1 krát v závislosti od stupňa citlivosti diagnostického systému. Ak je to potrebné, opätovné testovanie sa vykonáva pomocou ultrazvukového činidla.

Vysoko kvalitná PCR

Čo je vysoko kvalitná PCR RNA pre hepatitídu C? Podstata reakcie spočíva v prítomnosti sekvencie hepatitídy RNA a reakcia je možná iba v prítomnosti vírusových proteínov podobnej etymológie v ELISA. Pri porovnávaní sa zisťuje zaťaženie a možné poškodenie pečeňovej oblasti.

Charakteristickým znakom tejto metódy je schopnosť detegovať aj prítomnosť oddeleného génu.

Treba poznamenať, že po získaní výsledkov testu PCR a testu ELISA pacient potrebuje vhodnú liečbu bez ohľadu na to, aký bol výsledný výsledok imunoanalýzy enzýmu. Pozitívna indikuje infekciu a PCR negatívna indikuje znížený počet vírusových častíc vzhľadom na úroveň citlivosti.

Existuje niekoľko podmienok, ktoré ovplyvňujú produkciu negatívnej PCR a ELISA:

  • nedostatok vhodných podmienok pre zber materiálu;
  • výsledná analýza obsahuje kontamináciu;
  • v prípade včasnej injekcie heparínu pacientovi.

Zo strany pacienta nie je potrebné dodržiavať určité pravidlá pre odber vzoriek krvi na analýzu PCR, v tomto prípade kvalita tejto analýzy závisí od lekára vykonávajúceho postup. Schopnosť zistiť prítomnosť ochorenia (najmä v akútnej forme) sa objaví v priebehu niekoľkých týždňov po infekcii.

Kvantitatívna analýza

Odporúča sa kvantitatívny test na zistenie vírusovej záťaže bezprostredne pred vznikom ďalšej liečby a reakcie organizmu. Proces odberu krvi sa vykonáva podobným spôsobom, ako pri vysokohodnotnej PCR a ELISA, jedinou podmienkou je absencia možnosti fajčiť pacienta pred procedúrou.

Čo sa týka charakteristík získaných údajov v dôsledku štúdie, zvýšené zaťaženie je charakterizované indikátormi od 800000 IU / ml, nízkymi - 400000 IU / ml. Prítomnosť vírusu v tele pacienta je indikovaná PCR pre hepatitídu nie je negatívny kvalitatívny test.

Tento druh výskumu umožňuje určiť, aký nebezpečný je pacient pre ľudí okolo neho. Napríklad identifikácia vysokej úrovne naznačuje zvýšenú infekčnosť pacienta. Okrem toho výsledky analýzy pomáhajú formulovať ďalšiu najúčinnejšiu liečbu a určiť, ako sa účinná liečba považuje za účinnú.

Rýchla negatívna odpoveď testov poukazuje na úspech zvolenej techniky a pomalá z nich naznačuje potrebu úprav a použitie rôznorodého postupu.

Proces vykonania postupu analýzy závisí od konkrétneho dňa choroby. Prvé stanovenie sa uskutoční prvý deň po prijatí pacienta do nemocnice, potom sa postup opakuje 4, 12 a 24 týždňov po užití liekov.

Kvantitatívna analýza teda ukazuje, ktorá liečba je najúčinnejšia, trvanie dostupnej terapie a nebezpečenstvo pacienta vo vzťahu k iným ľuďom.

genotypu

V štúdii materiálovej analýzy je dôležité určiť presnosť genotypu vírusu, ktorý prebieha. V súčasnosti existuje 11 odrôd vírusu hepatitídy C, ktoré na druhej strane zahŕňajú určité poddruhy.

Všetky tieto druhy reagujú odlišne na rôzne druhy liečby a jednotlivé druhy sú absolútne rezistentné voči mnohým liekom.

Genotyp umožňuje určiť a preukázať stav pečene. Nie je nezvyčajné, aby boli výsledky zaznamenané "nešifrované", čo znamená, že tento testovací systém nezistil vírus v krvi pacienta. To sa dá zistiť, ak určitý genotyp nezodpovedá tejto zóne. V takejto situácii sa analýza opakuje a na štúdium materiálu sa používa citlivejší systém.

Ultra citlivá metóda

Ultrasenzitívna metóda je potrebná v určitých prípadoch, keď diagnózu hepatitídy nemožno vykonať inými metódami a kedy urobiť analýzu určuje ošetrujúci lekár:

  • v prípade podozrenia na prítomnosť vírusu hepatitídy C u pacientov s latentným typom ochorenia;
  • prítomnosť protilátok proti vírusu hepatitídy C, ktorá nie je potvrdená diagnostikou PCR;
  • aby sa určila kvalita účinnosti zvoleného spôsobu liečby a potvrdila eliminácia choroby.

Citlivosť tejto metódy je oveľa vyššia ako bežne používaná metóda, avšak táto metóda nevylučuje získanie falošných výsledkov, pozitívnych aj negatívnych. V takejto situácii je dôležité kontrolovať kvalitu postupu a možnosť kontaminácie samotného materiálu.

Vysvetlenie analýzy PCR

Dekódovanie analýzy sa uskutočňuje na základe predložených materiálov, zatiaľ čo výsledky laboratórnych štúdií zahŕňajú určité údaje opísané vyššie.

Dekódovanie môže zahŕňať pozitívnu PCR polymerázovú reťazovú reakciu a negatívnu ELISA v teste, čo znamená, že pacient nemá žiadne príznaky hepatitídy C v krvi, ale v minulosti preniesol akútnu formu ochorenia. Spravidla sa pri diagnostikovaní špecialisti uchýlia k používaniu testovacích indikátorov PCR.

Zhrnutie všetkých uvedených skutočností možno vyvodiť záver, že počas analýzy je dôležité dodržiavať všetky pravidlá a odporúčania tak, aby získané výsledky boli čo najpresnejšie a na základe získaných údajov je možné určiť účinnosť použitej terapie a ďalšiu šancu na úplné zotavenie.

PCR analýza pre hepatitídu C

Na diagnostiku "chronickej vírusovej hepatitídy C (CVHS)" sa vyžaduje komplexné vyšetrenie osoby, ktoré zahŕňa klinické, laboratórne a inštrumentálne štúdie. Dôležitým z hľadiska diagnózy pre správnu diagnózu je metóda PCR - polymerázová reťazová reakcia.

Čo ukazuje táto analýza a prečo je to potrebné?

Táto laboratórna metóda deteguje RNA vírusu hepatitídy C v ľudskej krvi. Spolu s enzýmom viazaným imunosorbentným testom (ELISA) na protilátky proti vírusu sa PCR používa na stanovenie diagnózy CVHC a genotypu jej patogénu. Tento výskum je jednou z najnovších metód laboratórnej diagnostiky. Jeho spoľahlivosť na CVHS presahuje 97%, čo sa považuje za veľmi dobrý ukazovateľ pre výskum.

Existujú tri krvné PCR testy pre CVHC: kvalitatívne, kvantitatívne a vírusové genotypizácie. Prvá štúdia (kvalitatívna analýza) vírusu ho deteguje v krvi a preto sa používa iba na diagnostiku.

Druhá (kvantitatívna) štúdia určuje stupeň vírusovej záťaže na tele, a preto sa používa na monitorovanie účinnosti liečby.

Tretia PCR (genotypizácia) objasňuje diagnózu, ktorá stanovuje genotyp vírusu, čo je veľmi dôležité pre určenie správnej antivírusovej liečby.

Podstatou technológie polymerázovej reťazovej reakcie je použitie enzýmov, ktoré množia genetický materiál patogénu v biomateriáli. V procese takejto replikácie sa trubica s krvou niekoľkokrát zohreje a ochladí na teplotu potrebnú na urýchlenie enzymatickej reakcie. V dôsledku týchto manipulácií množstvo vírusového genómu sa mnohonásobne zvyšuje, čo umožňuje jeho detekciu aj s minimálnym množstvom.

Diagnostika PCR má veľa výhod oproti iným laboratórnym testom:

  • vysoká citlivosť - 97-98%;
  • zaručená analytická špecifickosť (odhaľuje presne patogén, ktorý chcete nájsť, a nie jeho súvisiaci kmeň);
  • rýchlosť vedenia (trvá maximálne 2 dni, kým sa nedosiahne záver).

Tri typy PCR testov

Vysokokvalitná analýza PCR sa priraďuje všetkým pacientom, u ktorých analýza ELISA detegovala protilátky proti vírusu HVGS. Po vykonaní vysokokvalitnej PCR sa dajú získať dve možnosti odpovede: "RNA je detegovaná" alebo "RNA nie je detegovaná". Na zistenie minimálneho množstva vírusu v krvi sú potrebné testovacie systémy s citlivosťou najmenej 50 IU / ml. Ak je koncentrácia vírusu v krvi pacienta menšia, než diagnostika môže určiť, výsledok štúdie môže byť falošne negatívny. Aby sa zabránilo takejto diagnostickej chybe, laboratóriá vykonávajúce diagnostiku PCR by mali byť vybavené veľmi citlivými testovacími systémami. V laboratóriu "Invitro" sa používajú napríklad testy s citlivosťou 15 IU / ml. Pracovníci laboratória sú povinní poskytnúť informácie o citlivosti testov pacientom a lekárom na základe ich prvej žiadosti.

Kvantitatívna analýza PCR určuje stupeň virémie, tj koncentráciu patogénu v krvi, vírusovú záťaž. Výsledok tejto štúdie, na rozdiel od vysoko kvalitnej PCR, sa vyjadruje počtom, napríklad 2 × 10 x 6 IU / ml, čo znamená 2 milióny medzinárodných jednotiek v 1 ml krvi. Niektoré laboratóriá používajú iný indikátor - počet kópií / ml. Tieto dva ukazovatele sa ľahko konvertujú: 1 medzinárodná jednotka sa rovná 4 kópiám RNA. Takže 2 x 10 x 6 IU / ml znamená, že 8 x 10 x 6 kópií vírusovej RNA v 1 ml, t.j. 8 miliónov kópií v 1 ml krvi.

Genotypizácia je definícia jedného zo šiestich genotypov vírusu. Klinický obraz, rýchlosť vývoja komplikácií pečene a prognóza budúceho života pacienta závisia od genotypu pôvodcu. Genotyp vírusu je veľmi dôležitý už v štádiu diagnostiky, pretože kombinácia liekov a trvanie terapeutického kurzu, ktorý má pacient priradiť, závisí od jeho správneho stanovenia.

Aj tento zdanlivo "dokonalý" laboratórny výskum má svoje nevýhody:

  • štúdia replikuje genetický materiál všetkých patogénov, dokonca aj neživých, čo môže skresľovať výsledok. Preto s cieľom monitorovať účinnosť pomocou PCR sa vykoná reanalýza nie skôr ako 2 mesiace po predchádzajúcej, takže mŕtve vírusy môžu "opustiť" telo pacienta;
  • časť vírusového genómu, ktorá sa určuje pomocou testovacích systémov, môže byť teoreticky prítomná v iných vírusoch alebo mikroorganizmoch, takže existuje možnosť falošnej pozitívnej odpovede;
  • vírusy sa rýchlo menia. Niekedy je rýchlosť a rozsah vírusovej mutácie taká vysoká, že testovací systém zastaví chytenie svojho genómu. Výsledkom je falošný negatívny výsledok.

Na vyrovnanie týchto nedostatkov vedú výrobcovia laboratórnych testovacích systémov pre diagnostiku PCR stále testy vrátane krížových reakcií a citlivosti na konkrétny genotyp vírusu.

Ako urobiť PCR test na hepatitídu C?

Na to, aby bola skúška PCR spoľahlivá, je potrebné dôsledne dodržiavať pravidlá prípravy na jej správanie:

  • výskum sa uskutočňuje na prázdny žalúdok (glukóza, tuky, minerály, ktoré vstupujú do krvi z potravy, môžu ovplyvniť rýchlosť a kvalitu enzýmovej reakcie);
  • medzera medzi posledným jedlom a odberom krvi na analýzu by mala byť aspoň 8 hodín;
  • v predvečer štúdie je zakázané užívať alkohol a konzumovať tučné jedlá, ktorých doba eliminácie je dlhá;
  • deň pred odchodom do laboratória by sa malo vyhnúť silnému fyzickému a emočnému stresu;
  • kým sa neodporúča fajčiť odber vzoriek krvi.

Aby sa zabránilo vzniku falošných záverov, údajný pacient musí prísť do laboratória o niečo skôr, než krv bude prijatá. Trvá 15-20 minút, kým človek zachyti dych, upokojí. Adrenalín, ktorý je prítomný v krvi po rýchlej prechádzke, môže mať vplyv na výsledok vyšetrenia.

Ak sa u pacienta, ktorý sa odvoláva na analýzu, vezme nejaké lieky, musí o tom informovať lekára. Je možné, že niektoré z nich budú musieť byť odmietnuté po určitý čas (ak je to možné).

Výsledok analýzy PCR pre hepatitídu C

Dekódovanie výsledkov laboratórneho lekára laboratória, ktorý vykonal analýzu. Dekódovanie je definícia odchýlky výsledku získaného z normy. Rýchlosť ukazovateľov stanovuje priamo výrobca skúšobného systému, ktorý používa laboratórium na diagnostiku. Preto nie je prekvapujúce, že v niektorých laboratóriách je vírusová záťaž stanovená v IU / ml a v iných v kópiách / ml.

Po prijatí záveru je potrebné, aby bolo možné ho správne interpretovať. Ošetrenie výsledkov štúdie by malo byť vykonané ošetrujúcim lekárom pacienta s hepatitídou C. Iba po objektívnom, inštrumentálnom a laboratórnom vyšetrení pacienta môže lekár dostať dostatočné množstvo údajov na správnu interpretáciu získaných výsledkov PCR.

Hodnotenie kvalitatívnej analýzy spravidla nespôsobuje ťažkosti ani u pacientov. Výsledok môže byť iba jeden: "zistené" alebo "nezistené". V tomto prípade je druhá z nich normou.

Ukazovatele kvantitatívnej analýzy je ťažšie interpretovať. Zobrazuje stupeň vírusovej záťaže pacienta. Dokonca ani medzi hepatológmi neexistuje konsenzus o tom, ako liečiť detekovanú vírusu. Väčšina lekárov má sklon veriť, že by sa malo zvážiť vysoké zaťaženie viac ako 8 × 10 * 5 IU / ml. Zaťaženie s hodnotou viac ako 1 × 10 * 7 IU / ml sa považuje za veľmi vysoké, zatiaľ čo nízke zaťaženie je menej ako 4 × 10 * 5 IU / ml.

Stupeň vírusovej záťaže naznačuje virulenciu (agresivitu) vírusu: čím väčšie je jeho množstvo v krvi, tým rýchlejšie sa môžu vyvinúť komplikácie pečene. Vysoká koncentrácia vírusu v krvi tehotnej ženy zvyšuje pravdepodobnosť jej penetrácie cez hemato-placentárnu bariéru k plodu. Viremia ovplyvňuje aj účinnosť liečby: pri nízkych počtoch je účinnosť terapie vyššia ako u vysokých.

Aby sme boli presvedčení o správnosti analýzy PCR pre hepatitídu C, je potrebné uprednostniť iba tie laboratóriá, ktoré pracovali dobre. Cenová politika v tomto prípade by nemala zohrávať primárnu úlohu.


Predchádzajúci Článok

Hepatoprotektory

Nasledujúci Článok

Lieky na cirhózu pečene

Viac Články O Pečeň

Zápal pečene

Bolesť žlčníka

Ak žlčník bolí, potom človek vie z charakteristickej lokalizácie bolesti, kde je jeho anatomické miesto. Nie všetci ľudia sú správne orientovaní a oboznámení s biliárnym systémom, ktorý zahŕňa žlčník a kanály.
Zápal pečene

Deformita žlčníka u dospelých

Domov »Choroby» Rôzne »Deformity žlčníkaDeformita žlčníkaDeformita žlčníka u dospelých sa vyskytuje z niekoľkých dôvodov. Môže to byť vrodená a nespôsobuje žiadne nepríjemné pocity, ale môže viesť k ochoreniam žlčníka (kameň, zápal, chronická cholecystitída, zvýšenie močového mechúra a iné).