Kvalitatívna analýza hepatitídy C

Zanechajte komentár 9 080

Kvalitatívna analýza polymerázovej reťazovej reakcie - PCR pre hepatitídu C určuje prítomnosť alebo neprítomnosť HCV v tele. V laboratórnych podmienkach sa študuje štruktúra RNA, ktorá zahŕňa vírus. V prípade detekcie vírusu C je potrebné podstúpiť liečbu, pretože zanedbaný stav pečene spôsobí vážne následky. Vysoká kvalita PCR sa vykonáva aj po zotavení na potvrdenie neprítomnosti protilátok. Pridelené na rutinnú kontrolu. Pri nízkej koncentrácii príčinného činidla v krvi nemôže PCR (kvalitatívna) zistiť nič, pretože diagnostický systém má svoje vlastné prahové hodnoty citlivosti. V prípade počiatočného štádia ochorenia alebo miernej formy sa ultra-diagnostika PCR uskutočňuje na ultra-citlivých zariadeniach.

Čo je RNA vírus?

Termín RNA vírusu hepatitídy C (alebo RNA vírusu hepatitídy C) je samotné ochorenie pečene. Vírus C sa viaže na zdravú bunku tela penetráciou do vnútra. V priebehu času sa šíri po celom tele, je potrebné len dostať sa do krvi. Výsledkom je, že patogén preniká do pečene, spojí sa s bunkami a pracuje tvrdo. Hepatálne bunky (hepatocyty) pracujú pod svojim vplyvom, prechádzajú zmenami a zomierajú. Čím dlhšie je vírus C v pečeni, tým väčší počet buniek zomrie. Postupne sa rozvíjajú nebezpečné choroby, ktoré vedú k zhubnej degenerácii a smrti.

Infekcia pečene s týmto typom vírusu sa nemusí prejavovať zvonka. Po mnoho rokov alebo desaťročia sa infikovaná osoba cíti úplne zdravá a iba náhodná vyšetrenie najčastejšie odhaľuje patológiu. Pri darovaní krvi na hepatitídu sa skúma časť reťazca RNA (ribonukleovej kyseliny), ktorá je súčasťou ľudského génu (DNA). Výsledky laboratórnych testov by sa nemali používať na samošetrenie, pretože to je iba indikátor. Presný obraz a ďalšiu diagnózu lekár určí lepšie.

Po vykonaní: indikácie pre výskum

Pri potvrdení HCV sa uskutočňuje analýza PCR (polymerázová reťazová reakcia). Štúdie PCR pomáhajú nájsť patogénny materiál v štruktúre RNA a predpísať účinnú liečbu. Určené v nasledujúcich prípadoch:

  • detekcia príznakov zápalu pečene;
  • skríningové štúdie na prevenciu;
  • vyšetrovanie osôb v kontakte;
  • diagnostika hepatitídy zmiešaného pôvodu (stanovenie hlavného patogénu);
  • stanovenie úrovne reprodukčnej aktivity vírusu v chronickej forme;
  • cirhóza pečene;
  • na určenie účinnosti predpísanej liečby.
Štúdie PCR sú predpísané lekárom na stanovenie účinnosti liečby hepatitídy.

Existuje kvalitatívna aj kvantitatívna analýza PCR. Kvantitatívna PCR ukazuje percentuálny pomer RNA k vírusovým nosičom v krvi a kvalitatívne naznačuje prítomnosť alebo absenciu vírusu. Pozitívny ukazovateľ kvality (prítomnosť RNA hepatitídy C) tiež potrebuje kvantitatívny výskum. Vysoká koncentrácia pôvodcu hepatitídy C je spojená s rizikom prenosu, teda infekcie iných. Nízke počty sú lepšie liečiteľné. Množstvo RNA vírusov v krvi sa netýka intenzity ochorenia. Analýza PCR sa vykonáva aj v prípade terapie interferónom s cieľom predpísať trvanie a zložitosť liečby.

Vlastnosti vysoko kvalitnej analýzy PCR pre hepatitídu C

Kvalitatívna analýza s indexom polymerázovej reťazovej reakcie je pridelená všetkým pacientom, ktorí majú v krvi protilátky proti hepatitíde C. Tí, ktorí boli chorí a boli zotavený, musia opäť vykonať test. Odporúča sa prejsť testom na hepatitídu B, potom v prípade pozitívneho záveru a na hepatitídu D. Tiež by mala byť vykonaná kvalitatívne analyzovaná reakcia v spojení s inými krvnými testami. Analýzy ukážu kompletný obraz šírenia vírusu.

Z výsledkov testov bude len pozitívny test na hepatitídu C viditeľný alebo negatívny, to znamená prítomnosť alebo neprítomnosť vírusu. Ak je výstup detekovaný, potom je vírus aktívny a je stále aktívny. Označenie "nezistené" označuje neprítomnosť vírusu alebo jeho malé množstvo. S týmto ukazovateľom by sa malo pamätať na to, že analytická citlivosť diagnostických systémov je odlišná a že hepatitída C RNA môže byť stále v krvi, ale v analýze sa to neprejavuje.

Obzvlášť citlivá metóda PCR ultra hepatitída C odhaľuje aj v miernom množstve. Použila sa fluorescenčná hybridizačná štúdia, ktorá je mnohonásobne vyššia ako štandardné PCR systémy. Metóda sa používa v niekoľkých prípadoch:

  • podozrivé skryté formy hepatitídy C;
  • Diagnostika PCR nepotvrdila patogén, ale existujú protilátky;
  • v prípade obnovy;
  • na odhalenie včasnej infekcie.
Späť na obsah

Analýza dekódovania

Dekódovanie PCR HCV ovplyvňuje konečné rozhodnutie pri diagnostike, najmä metódou ultrametód. Hlavnou nevýhodou tejto štúdie je prísne dodržiavanie sterilných podmienok pre vzorku a materiály. Mierna odchýlka niekedy vykazuje nepresné analytické závery, komplikuje diagnostiku a následnú liečbu. Analýza PCR na stanovenie hepatitídy RNA nie vždy s istotou ukazuje obraz choroby, niekedy aj nepresnosti a v oboch smeroch.

Pri diagnostike vírusu hepatitídy sa odporúča použiť komplexné vyšetrenie.

Norma ukazovateľov

Neprítomnosť protilátok JgM proti vírusovej hepatitíde C vo výsledkoch štúdie sa považuje za normu pri analýze polymerázovej reťazovej reakcie. Súčasne zistenia sérologickej analýzy naznačujú prítomnosť protilátok proti vírusu C a to je tiež v normálnom rozmedzí. Kvalitatívna definícia neukazuje intenzitu ochorenia, odhaľuje len pôvodcu hepatitídy C v RNA. Táto analýza sa po liečbe opakuje, aby sa potvrdila skutočná regenerácia.

odchýlky

Ak sú prítomné protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to, že došlo k vzniku infekcie. Choroba súčasne prebieha akútne alebo chronicky, prejavuje sa v rôznych štádiách. Ak sa zaznamená pokles počtu protilátok, analýza bude naznačovať, že výsledky liečby boli dosiahnuté počas regenerácie. V diagnostike sa zistili len veľmi zriedkavé prípady falošných pozitívov. Nachádzajú sa u žien počas tehotenstva a u ľudí s inými infekčnými chorobami.

Dekódovanie analýzy PCR pre hepatitídu C

Špeciálna laboratórna štúdia - analýza PCR pre hepatitídu C - výrazne zjednodušuje diagnostiku tohto vírusového ochorenia. Hepatitída C nie je výnimkou. Malá vzorka krvi môže byť testovaná na obsah rna a iného genetického materiálu vírusového činidla. Všetci jedinci s protilátkami proti hepatitíde C, ktorí cirkulujú v krvnej plazme, sa podrobia analýze PCR, ktorej prítomnosť potvrdila kvalitatívnu detekciu.

Interpretácia výsledkov je interpretovaná v stĺpci výskumného formulára ako "pozitívna" alebo "negatívna" analýza. Navyše pomocou PCR je možné nielen určiť minimálny obsah vírusu, ale aj spočítať počet častíc. Preto je možné stanoviť odhadované vírusové zaťaženie a čo najpresnejšie určiť taktiku lekárskej liečby.

Vírusové poškodenie pečene

Pečeň ako súčasť zažívacieho traktu má veľké bremeno. Vo svojich bunkách dochádza k väčšine metabolických reakcií všetkých typov metabolizmu, čo zabezpečuje optimálne fungovanie všetkých orgánov a systémov. Jeho detoxikačná hodnota je zároveň dobrá na odstraňovanie trosiek a metabolických produktov s enzymatickou žlčou.

Porážka pečene vírusmi rôznej povahy je mimoriadne nebezpečná pre telo. Rozmanitý klinický obraz a nedodržanie liečby vedie k hepatitíde na prvé miesto z hľadiska zdravotných rizík. Hepatitída C je chronická a môže byť dlhodobo negatívna, pomaly parazitujúca v ľudskom tele. Vírus sa prenáša prostredníctvom biologických tekutín: krvi a menej často prostredníctvom spermy. Zneužívanie drog z nesterilných striekačiek, prirodzená dodávka infikovaných žien, náhodné poranenia alebo škrty zo strany zdravotníckych pracovníkov môže viesť k prenosu vírusu zdravým ľuďom.

Včasnú diagnostiku ochorenia brzdí skrytý klinický obraz a nesystematická patológia. Pozitívny výsledok môže byť jednoducho vynechaný slabo výkonnými analýzami. Iba významné poškodenie pečeňových buniek spôsobuje určitú symptomatológiu, avšak negatívny účinok viremie v tom čase nemá žiadnu šancu obnoviť orgán.

Moderná medicína vyvinula špeciálne metódy na rozpoznanie najmenších stôp vírusu. PCR, IFA, pečeňová biopsia dokáže odhaliť najmenšie poškodenie pečene a minimálnu hladinu protilátok proti vírusu. Analýza pomocou PCR je najjednoduchšia a najspoľahlivejšia v diagnostickej praxi.

Kvalitatívna analýza

Podstatou polymerázovej reakcie je vytvorenie sekvencie rna. Reakcia sa uskutočňuje v prítomnosti rovnakých vírusových proteínov v krvnej plazme.

Špeciálne katalyzátory umožňujú syntetizovať podobnú vírusovú sekvenciu reťazca, ktorá sa porovnáva so známymi nukleotidmi vírusovej RNA. Na základe toho určujú vírusovú záťaž a poškodenie pečene.

PCR je schopná zachytiť aj jedinú prítomnosť požadovaného génu v odobratej krvi. Takáto diagnostická reťazová reakcia je tiež veľmi špecifická. Sekvencia nukleotidových reťazcov je jedinečná pre každé stvorenie, takže enzymatické priméry vytvárajú identické sekvencie požadovanej genetickej informácie. Takže každý vírus môže byť detegovaný s najmenšou presnosťou, aj keď jeho kvantitatívny ukazovateľ je extrémne malý.

Pacienti, v ktorých krvi sa zistili protilátky proti vírusovej hepatitíde, vykonali kvalitatívnu štúdiu PCR alebo Eph. Výsledok analýzy môže byť pozitívny aj negatívny, čo v oboch prípadoch vyžaduje liečbu.

Pozitívna reakcia reťazovej reakcie by sa mala dešifrovať ako prítomnosť fragmentov RNA vírusu hepatitídy alebo ako fenomén infekcie.

V krvnej plazme v okamihu, keď sa vírus aktívne množí a parazituje pečeňové bunky. Diagnostika PCR môže poskytnúť negatívnu odpoveď, ak je v plazme prítomná len málo častíc vírusovej RNA, pod úrovňou citlivosti testu alebo vôbec nie. Po priamej infekcii množstvo vírusu rastie pomerne pomaly a až po 1 až 2 týždňoch, ak je schopný izolovať ich iný kvalitatívny výskum.

Negatívnu analýzu je možné získať v nasledujúcich prípadoch:

  1. Pri odoberaní materiálu v nevhodných podmienkach, získanie vzorky krvi s kontamináciou;
  2. Ak pacient už predtým dostal heparínové injekcie.
  3. S prítomnosťou iných enzýmov a substrátov v odobratých vzorkách, ktoré narušujú priebeh reťazovej reakcie.

Kvantitatívna analýza

Kvantitatívny test ako mikrobiologická diagnóza je určený na určenie vírusovej záťaže. Potvrdená kvalitatívna analýza virémie slúži ako základ pre stanovenie množstva genetického materiálu a jeho koncentrácie. Počet detegovaných vírusových rna sa stanoví v jednotke objemu krvi, zvyčajne v 1 mililitroch. Požadované materiály sú vyjadrené v medzinárodných jednotkách, niektoré laboratóriá používajú počet kópií v analýze eif.

Zvyčajne sa kvantitatívne analyzuje PCR pred akýmkoľvek terapeutickým režimom. Počítanie vírusových rna sa vykonáva dosť často: po jednom, štyroch, dvanásť a dvadsaťštyri týždňoch. 12. týždeň sa považuje za orientačný, pretože na základe analýzy sa v tomto období uskutočňuje interpretácia účinnosti terapeutických opatrení.

Kvantitatívna analýza pomocou PCR alebo IFA zahŕňa odber vzoriek z žily.

Interpretácia výsledkov ako vysokej vírusovej záťaže začína počtom 800 000 IU / ml. Takýto pozitívny výsledok pre hepatitídu C odráža prítomnosť najmenej 3 000 000 kópií na mililiter krvi. Nízka hladina viremie sa zastaví pri 400 000 IU / ml. Výsledky štúdie môžu byť hodnoty ako negatívna odpoveď, ako aj ukazovateľ "pod meracím rozsahom".

Kvantitatívny test s odhadom "pod rozsahom merania" hovorí, že počas reakcie nebolo možné vypočítať RNA. Vírus stále cirkuluje v tele, ako naznačuje pozitívny kvalitatívny test. Negatívny indikátor kvantitatívnej analýzy pcr alebo ifa indikuje absenciu rna v tejto krvi.

Napriek obmedzeným metódam prenosu vírusu krvou sa zvyšuje riziko prenosu vírusu cez sekréciu pohlavných žliaz z matky na dieťa.

Kvantitatívna analýza poskytuje významnú pomoc pri hodnotení terapeutických zásahov. IFA a PCR odrážajú účinok antivírusových liekov, pomáhajú stanoviť načasovanie terapie a posúdia tvorbu imunity pacientov. Skorá negatívna reakcia laboratórnych testov naznačuje úspešnú liečbu a potrebu skrátiť trvanie liečby. Pomalý pokles virémie možno interpretovať ako potrebu zmeniť terapeutický priebeh. Úroveň vírusovej záťaže určuje prognózu ochorenia. Hepatitída s nízkou frekvenciou je pravdepodobne jednoducho liečená a vírus možno úplne odstrániť z tela. Vysoká miera prítomnosti vírusu v krvi vyžaduje starostlivú pozornosť a všestrannú liečbu.

Medinfo.club

Portál o pečeni

Vysokokvalitná štúdia PCR o HCV a jej interpretácii

Hepatitída C je vírusová choroba, ktorá postihuje životne dôležité ľudské orgány. Na stanovenie stupňa a typu ochorenia, ako aj na predpisovanie účinnej liečby, je potrebné podstúpiť kvalitatívnu analýzu hepatitídy C v krvi.

PCR vykonala kvalitatívnu analýzu hepatitídy C, ktorá študovala DNA vírusu. Veľkosť viriónu tohto testu je 30 až 60 nm. Lekári poznamenávajú, že tento mikroorganizmus je schopný mutovať na dobu neurčitú. Viac informatívnych výsledkov testov je ráno: od 08:00 do 11:00 a na prázdny žalúdok.

Typy analýz PCR

Treba poznamenať, že PCR sa delí na tri typy: kvantitatívne, kvalitatívne a genotypizujúce. Podľa odborníkov, kvantitatívne viac informatívne, ako to naznačuje vírusové zaťaženie, ktoré určuje množstvo infekcie RNA. Takýto test je takisto priradený pacientovi na začiatku liečby a kontrola v 12. týždni už zvoleného spôsobu liečenia vírusu.

Genotypizácia stanovuje typ genotypu, ktorý sa nachádza v pacientovej krvi.

Podľa lekárskej praxe používame kvalitatívnu analýzu na určenie infekcie v 1-3 týždňoch infekcie. Ale aj po absolvovaní testu, ktorého výsledky budú negatívne, človek môže byť nosičom tejto choroby. Preto lekári odporúčajú opakovať štúdiu po 10 dňoch.

Rozdiel v kvalitatívnom a kvantitatívnom výskume

Analýza PCR pre kvalitu hepatitídy C má hlavnú výhodu - môžete trvať jeden a pol až dva týždne po infekcii, potom keď sa kvantitatívny môže vykonať po 4,12,24 týždni. Lekári hovoria, že niekedy výsledky obidvoch štúdií môžu byť v rozpore sami. Toto je uľahčené napríklad stavom pacienta: tehotenstvo alebo kontaminácia zariadení na odber krvi alebo nedodržanie predianostatických pravidiel pacienta.

Hlavnými výhodami kvantitatívnej metódy sú:

  • identifikácia genetickej náchylnosti k tejto chorobe,
  • určenie zdroja pôvodcu vírusu,
  • vysokou citlivosťou zložiek štúdie.

Najzákladnejšia nevýhoda kvalitatívnej metódy sa považuje za falošne pozitívny alebo falošne negatívny výsledok.

Dekódovanie kvalitatívnej analýzy

Aby sme mohli rozlíšiť výsledky získané kvalitatívnou metódou, mali by sme venovať osobitnú pozornosť ich interpretácii: "pozitívna" a "negatívna". Prvý naznačuje, že telo má RNA vírusu. Tí, ktorým bola diagnostikovaná infekcia v budúcnosti, sú predpísané kvantitatívnou diagnostikou.

Ale len lekár môže interpretovať výsledky.

Ak osoba zistí výsledok "negatívny", potom telá vírusu sa nenachádzajú v tele pacienta, a preto osoba, ktorá podala žiadosť, je zdravá. Lekári však odporučia, aby sa táto analýza znova po 10 dňoch úplne preverila vyhlásenie výsledku.

norma

Odborníci upozorňujú na skutočnosť, že je potrebné uskutočniť výskum s použitím vysokého prahu citlivosti diagnostických zložiek - 50 IU / ml. Tento údaj zodpovedá testu Cobas, RealBest (15 IU / ml).

Indikátor pre špeciálnu citlivosť by nemal prekročiť 600 IU / ml, potom je pacient úplne zdravý. Ak sa ukazovatele zhoršujú, je potrebné vykonať kvantitatívnu analýzu, ktorá pomôže zistiť zdroj vírusu.

Typy diagnostických systémov a ich chyby

Rozmanitosť systémov na preskúmanie prítomnosti alebo absencie ochorenia závisí od účelu diagnózy: test sa vykoná po prvýkrát alebo sekundárne. To je potrebné na získanie čo najpresnejších výsledkov.

Napríklad: ak pacient už podstupuje liečbu hepatitídy C, ale jeho lekár pochybuje o účinnosti predpísanej liečby alebo naopak, chce určiť stupeň progresie, potom špecialista na PCR použije systém s citlivosťou 50 IU / ml a viac. Napríklad analyzátory: Cobas Ampicolor - Test a RealSBest HCV.

Okrem toho je okrem PCR tiež relevantná metóda TMA (transkripčná amplifikácia), v ktorej stupeň diagnostikovanej citlivosti je oveľa vyšší. Ale stojí to oveľa viac.

Indikácie pre vymenovanie a kde sa má vykonať analýza

Najčastejšie sa táto analýza predpisuje, keď sa objavia prvé príznaky ochorenia pečene, vyšetrenie, diagnostika hepatitídy, stanovenie aktivity / pasivity priebehu ochorenia, cirhóza pečene alebo stanovenie účinnosti predpísanej liečebnej metódy.

Ak máte podozrenie na hepatitídu C, potom táto analýza dokáže potvrdiť alebo vyvrátiť obavy. Pozrite tiež možné spôsoby, ako sa v tomto článku môžete nakaziť hepatitídou C.

Kvalitatívna analýza pomáha identifikovať prítomnosť / neprítomnosť choroby. Ale ako pri akejkoľvek diagnóze, existujú odchýlky: protilátky JgM sa nachádzajú v krvi, choroba je akútna a bolestivá. Ak tento indikátor klesne s už existujúcou liečbou, znamená to, že pacient je v štádiu zotavenia.

Najlepšie je vykonať analýzu v laboratóriu v nemocnici, kde ste sledovaní. Ale ak existuje možnosť, potom je to možné aj v každej platenej laboratóriu. Hlavná vec, opakované alebo iné testy, prejsť iba na jednu kliniku, ak samozrejme nedošlo k chybnej diagnóze. Je to spôsobené tým, že každé laboratórium má svoje vlastné štandardné ukazovatele, ktoré závisia od techniky, na základe ktorej vedú výskum. Preto bude normou považovaný aj ten istý indikátor 600 IU / ml v jednej laboratóriu av druhom prípade už je to signál pre stanovenie diagnózy "hepatitídy C". Preto sledujte dodržiavanie takýchto elementárnych vecí, kvôli čomu môžete urobiť nesprávnu diagnózu.

K dnešnému dňu sa lieky proti hepatitíde C už vo svete objavili s účinnosťou blízkou 100%. Moderný farmaceutický priemysel vytvoril lieky, ktoré prakticky nemajú vedľajšie účinky. Mnohí pacienti dostanú prvé výsledky vo forme zmiernenia symptómov a zníženia vírusovej záťaže po týždni príjmu. Ako možno nájsť generické lieky proti hepatitíde C z Indie.

Kvalitatívna analýza PCR pre hepatitídu C

Hepatitída je vážna choroba, ktorá má mnoho príčin. Základom jeho vývoja je priame alebo nepriame poškodenie pečene. Ak vezmeme do úvahy jeho význam pre celý organizmus, možno len odhadnúť, aké ťažké je patológia. V tomto článku budeme podrobnejšie skúmať charakteristiky kurzu a laboratórnu diagnostiku hepatitídy C.

Príčinou tohto ochorenia je vírusové činidlo, ktoré sa týka patogénov obsahujúcich RNA. Má charakteristickú vlastnosť - schopnosť mutovať, čiže zmeniť štruktúru. Z tohto dôvodu uniká infekcia z napadnutia imunitného systému a vo väčšine prípadov vedie k chronickému zápalu pečene.

Vzhľadom na existenciu rôznych podtypov vírusu by výber liekov mal byť založený na výsledkoch genotypizácie. Napriek dlhej štúdii o ochorení a štruktúre HCV nebolo zatiaľ možné vyvinúť špecifickú očkovaciu látku proti tejto chorobe.

Problémy včasnej diagnostiky spočívajú v asymptomatickom priebehu hepatitídy, v dôsledku čoho osoba navštevuje lekára v štádiu cirhózy. Na zistenie tejto choroby včas sa vyžadujú pravidelné lekárske vyšetrenia. Iba laboratórnym vyšetrením krvi je možné odhaliť HCV a zabrániť kontaminácii ostatných. Faktom je, že nosič infekcie môže po dlhú dobu nehádať o patológii a pokračovať v prenosu vírusu zdravým ľuďom.

Spôsoby prenosu

Vo väčšine prípadov sa vírus šíri cez krv, pretože obsahuje najvyššiu koncentráciu patogénnych látok. Preto sa infekcia prenáša:

  • s hemodialýzou;
  • s infikovanou ihlou;
  • v procese boja, keď je koža zranená a dochádza k kontaktu s krvou;
  • s transfúziou krvi (transfúzia krvi).

Pravdepodobnosť infekcie počas intimity je nevýznamná, pretože sperma a vaginálny výtok obsahujú malé množstvo patogénov. Riziko infekcie sa významne zvyšuje pri narušení integrity slizníc genitálií. Toto sa pozoruje u agresívneho a análneho sexu.

Pokiaľ ide o vertikálny spôsob prenosu, vykonáva sa v procese práce. V období gravidity plodu nemôže patogén preniknúť do placenty do embrya. Pri prirodzenom pôrode sa patogénne činidlo prenáša na dieťa, keď je poškodená koža, keď je pozorovaný kontakt s matkou krvou.

Po preniknutí patogénu do zdravého organizmu začne syntéza protilátok, čo je ochrana proti infekcii a patrí do imunitných štruktúr. Sú nájdené v počiatočnej štúdii osoby, ktorá používa metódu ELISA.

Na potvrdenie diagnózy pacienta sa uskutočňuje polymerázová reťazová reakcia. Ide o analýzu genetického materiálu patogénneho činidla a stanovenie vírusovej záťaže.

Laboratórna diagnostika hepatitídy C

Laboratórna diagnostika začína enzýmovou imunotestou. Jeho hlavnou úlohou je odhaliť protilátky proti patogénu. Jeho účinnosť je takmer 95%. Vďaka tomuto výskumu je možné identifikovať nosič vírusu v predklinickej fáze a poslať ho na ďalšie vyšetrenie.

Kvalitatívna analýza ELISA indikuje prítomnosť alebo neprítomnosť imunoglobulínov v krvi pacienta. Jeho výsledok môže byť "pozitívny" alebo "negatívny". Po obdržaní prvej odpovede je osoba poslaná na ďalšie vyšetrenie - PCR. Jeho cena závisí od kvality reagencií a laboratória. Náklady na polymerázovú reťazovú reakciu môžu dosiahnuť 4 tisíc rubľov.

PCR funkcie

Pri použití polymerázovej reťazovej reakcie nám dokonca aj malé množstvo biologického materiálu umožňuje odhadnúť vírusovú záťaž v krvi, tj vypočítať koncentráciu patogénov v jednom mililitri tekutiny.

S príchodom PCR sa diagnostika hepatitídy stala oveľa jednoduchšou. Analýza umožňuje identifikovať HCV RNA, stanoviť stupeň infekčného procesu a infekčnosť nosiča vírusu.

Existuje niekoľko typov genetickej diagnostiky:

  1. Kvalitatívna analýza PCR pre hepatitídu C - potvrdzuje prítomnosť alebo neprítomnosť HCV v krvi subjektu:
  2. kvantitatívne, pomocou ktorého môžete vypočítať koncentráciu vírusov a stanoviť štádium choroby. Výsledok je uvedený v IU / ml alebo v kópiách / ml (v závislosti od laboratória);
  3. genotypizácia - potrebná na určenie genotypu HCV. To je potrebné pre presný výber liekov, ktoré budú v tomto prípade najefektívnejšie. Analýza nepriamo poukazuje na závažnosť patologického procesu v pečeni. Teda s tretím genotypom patogénu sa najčastejšie pozoruje steatóza, ktorej základom je nahromadenie tuku v hepatocytoch (jeho bunkách). Okrem toho typ vírusu ovplyvňuje výsledok a trvanie terapeutického kurzu.

Kvalitatívna analýza PCR pre hepatitídu C

Najprv sa v laboratóriu skúma biologický materiál na prítomnosť HCV RNA. Je dôležité mať na pamäti, že kvalitatívna analýza hepatitídy C má určitú úroveň citlivosti, a preto nemusí vždy správne odpovedať. V tomto prípade sa odporúča vykonať laboratórnu diagnostiku pomocou iných činidiel.

Na získanie spoľahlivých výsledkov by sa mali použiť testovacie systémy s citlivosťou najmenej 50 IU / ml.

Diagnostický výsledok môže byť buď "pozitívny", alebo "negatívny". Ak sa patogén nenachádza v krvi, štúdia sa dokončí. Ak je vo vzorke detekovaná patogénna látka, kvantifikuje sa vírusová záťaž.

Falošne negatívna odpoveď sa dosiahne pri narušení procesu, napríklad aktívne komponenty, ktoré potláčajú konštrukciu kópií patogénu do prostredia. Preto nie je možné zobraziť skutočný krvný obraz, a preto nie je diagnostikovaná infekcia človeka.

Falošne pozitívny výsledok možno získať, ak bola kontaminovaná trubica na zber biologického materiálu, ako aj prostredie pre štúdiu. Okrem toho je takáto analýza reakcie možná so zmiešanými infekciami, keď je pečeň ovplyvnená niekoľkými vírusmi, napríklad hepatitída C a D.

Indikácie pre kvalitatívny výskum

Lekár môže predpísať pacientovi kvalitatívnu štúdiu o identifikácii RNA vírusu hepatitídy C:

  • po prijatí pozitívnej alebo pochybnej odpovede na enzýmovú imunoanalýzu;
  • na overenie diagnózy;
  • určiť vírusové zaťaženie;
  • stanovenie štádia ochorenia;
  • diagnostikovanie zmiešaných infekcií. Hepatitída C často infikuje pečeň súčasne s vírusom "D";
  • stanovenie terapeutickej taktiky pri zohľadnení genotypu pôvodcu;
  • hodnotenie dynamiky zmien počas liečby antivírusovými liekmi.

Výhody polymerázovej reťazovej reakcie zahŕňajú:

  1. vysokú citlivosť technológie, ktorá umožňuje zistenie faktu infekcie v predklinickej fáze;
  2. identifikácia genetického materiálu patogénu a nie protilátky proti nemu;
  3. možnosť vytvorenia podtypu patogénneho činidla;
  4. vysokú rýchlosť diagnostiky, pretože nevyžaduje očkovanie materiálu na živnom médiu a stačí použiť špecifické testovacie systémy. Osoba dostane výsledok po 5 hodinách;
  5. univerzálnosť. Analýza umožňuje identifikovať akýkoľvek genetický materiál (RNA, DNA). Vďaka tomu môže lekár potvrdiť hepatitídu C a iné choroby (B);
  6. schopnosť detekovať latentnú infekciu.

Kvantitatívny výskum

V štúdii krvi pomocou polymerázovej reťazovej reakcie možno vypočítať počet patogénov vo fixnom objeme biologického materiálu. Indikátor je uvedený v IU / ml. Analýzou je možné určiť stupeň infekcie pacienta, určiť stupeň infekčného procesu a tiež zhodnotiť účinnosť farmakoterapie.

Na základe PCR špecialista rozhodne, ktoré dávky liekov môžu zablokovať reprodukciu patogénov. Okrem toho sa stanoví trvanie antivírusovej liečby a prognóza na životnosť. Je dôležité mať na pamäti, že testovacie systémy majú vysokú citlivosť, takže metóda umožňuje potvrdiť infekciu osoby v predklinickej fáze.

genotypu

Vzhľadom na schopnosť mutácie patogénu je potrebný jej genotyp na určenie taktiky liečby a výberu protivírusových liekov. Napríklad liečba hepatitídy B HCV 1 trvá 48 týždňov, s pozitívnym trendom pozorovaným iba v 60% prípadov. Genotypy 2 a 3 majú priaznivejšiu prognózu. Antivírusové lieky sú predpísané počas 8 mesiacov a ich účinnosť dosahuje 85%.

Podľa štatistík sú vo väčšine prípadov HCV 1, 2 a 3 registrované v Ruskej federácii.

Pri dešifrovaní laboratórneho testu môže byť táto odpoveď uvedená - "nie je zadaná". Znamená to, že vírus cirkuluje v obehovom systéme pacienta a testovací systém ho nedokáže rozpoznať. Výsledok analýzy v tomto prípade naznačuje, že patogén nie je typický pre danú geografickú oblasť.

Ako získať spoľahlivé výsledky?

Na to, aby kvalitativita štúdie PCR na detekciu RNA pôvodcu hepatitídy C preukázala správne výsledky, je potrebné dodržať požiadavky na prípravu na laboratórnu diagnostiku:

  1. odber krvi sa vykonáva prázdnym žalúdkom a "hladová" medzera by nemala byť kratšia ako 8 hodín;
  2. dva dni pred štúdiom sa odporúča prestať piť alkoholické nápoje a opustiť pikantné, mastné a údené jedlá;
  3. zrušiť zavedenie liekov, ktoré znižujú zrážanlivosť krvi, napríklad heparín. Ak sú tieto lieky predpísané zo zdravotných dôvodov, musíte to oznámiť lekárovi. Okrem toho by odborník mal vedieť o prijatí iných liekov, ktoré môžu ovplyvniť výsledky laboratórneho výskumu;
  4. V predvečer zberu biologického materiálu by sa nemali vykonávať fyzioterapeutické postupy a nemali by byť vystavené silnému fyzickému namáhaniu.

Výsledky analýzy môžu ovplyvniť nielen osoba, ktorá daruje krv, ale aj iné faktory, a to:

  • nekvalitné odbery krvi;
  • nedodržiavanie odporúčaní týkajúcich sa prepravy biologického materiálu;
  • nedostatočná odborná príprava laboratórnych pracovníkov;
  • nedodržanie výskumnej techniky;
  • zavedenie antikoagulancií (heparínu) v predvečer odberu krvi. Táto skupina liekov znižuje zrážanlivosť, čím spomaľuje prácu činidiel.

V rôznych laboratóriách sa diagnostická odpoveď môže mierne líšiť, ale tieto chyby neovplyvňujú konečný výsledok štúdie.

Osobitná pozornosť sa venuje typom testovacích systémov, ktoré sa používajú v laboratóriu. Často sa uprednostňujú činidlá s vysokou citlivosťou. To je dôležité pre pacientov s nízkou vírusovou záťažou, pretože je ťažké ich zistiť.

Ako často sa vykonáva laboratórna skúška?

Primárna polymerázová reťazová reakcia sa uskutočňuje u osôb, ktoré boli detegované imunotestmi protilátok proti patogénu hepatitídy. V tomto prípade je určený na potvrdenie infekcie osoby a na určenie štádia ochorenia. Okrem toho analýza umožňuje určiť podtyp vírusu, ktorý je obzvlášť dôležitý pri výbere liekov.

Ďalšie obdobie povinného laboratórneho testovania je 3 mesiace od začiatku antivírusovej liečby. Diagnostika umožňuje posúdiť účinnosť liekov, upraviť dávku alebo ju nahradiť.

Okrem základných testov môže byť PCR dodatočne vykonaná po 4 a 24 týždňoch od začiatku liečby. Pozitívna prognóza ochorenia je potvrdená znížením vírusovej záťaže po troch mesiacoch liečby. Napríklad by sa mal znížiť z 1 milióna IU / ml na niekoľko sto tisíc.

Ak koncentrácia patogénnych látok v krvi zostane na rovnakej úrovni alebo sa mierne zvýši, znamená to neúčinnosť antivírusových liekov a vyžaduje ich výmenu. Použitím PCR na konci liečby je možné potvrdiť zotavenie pacienta.

Správne interpretovanie výsledkov laboratórnej diagnostiky vyžaduje konzultáciu s odborníkom na hepatológiu alebo špecialistu na infekčné ochorenia. Vzhľadom na vysokú frekvenciu falošných odpovedí v testoch ELISA sa analýza používa výlučne na počiatočné skríningové vyšetrenie. Na dôkladnejšie vyšetrenie pacienta sa použila polymerázová reťazová reakcia.

Č. 350СВ, Kvantitatívne stanovenie RNA vírusu hepatitídy C pomocou PCR [vírusová záťaž] (HCV vírusová záťaž, vírusová hepatitída C RNA (kvantitatívny test)) v sére

Stanovenie RNA vírusu hepatitídy C v sére metódou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) s detekciou "reálneho času".

detegovateľné miesto špecifické pre fragment RNA vírusu hepatitídy C; Špecifickosť stanovenia je 100%. Citlivosť na detekciu - 60 IU / ml Lineárny rozsah: 10 ^ 2 - 1 x 10 ^ 8 IU / ml.

  • Pozitívny kvalitatívny test na prítomnosť RNA vírusu hepatitídy C v sére.
  • Určenie vírusovej záťaže.
  • Určovanie taktiky liečby pacientov.
  • Presné posúdenie účinnosti liečby.

Interpretácia výsledkov výskumu obsahuje informácie pre ošetrujúceho lekára a nie diagnóza. Informácie v tejto časti nemožno použiť na vlastnú diagnostiku a samoliečbu. Presná diagnóza dá lekára, s využitím výsledkov tohto prieskumu, ako aj relevantné informácie z iných zdrojov: anamnézu, výsledky ďalších výskumov, atď

Merné jednotky: množstvo RNA vírusu hepatitídy C vyjadrené v IU / ml. Pre konverziu na kópiu / ml sa má použiť pomer 1 IU = 2,5 kópií RNA vírusu hepatitídy C.

  • Všeobecné informácie
  • Príklady výsledkov

až 4 pracovné dni

* Špecifikovaná doba nezahŕňa deň prevzatia biomateriálu

Detekcia PCR v reálnom čase.

príklady výsledkov formulára *

* Upozorňujeme na skutočnosť, že pri objednávaní viacerých štúdií sa niekoľko výsledkov výskumu môže prejaviť na jednej forme.

V tejto časti môžete zistiť, koľko stojí za dokončenie tejto štúdie vo vašom meste, pozri popis testu a tabuľku interpretácie výsledkov. Výber miesta, kde sa má vykonať analýza "Kvantitatívne stanovenie RNA vírusu hepatitídy C pomocou PCR [vírusová záťaž] (HCV vírusová záťaž, vírusová RNA vírusu hepatitídy C (kvantitatívny test)) v krvnom sére" v Irkutsku av ďalších mestách Ruska Náklady na procedúru biomateriálu, metódy a načasovanie výskumu v regionálnych lekárskych kanceláriách sa môžu líšiť.

Kvalitatívna a kvantitatívna analýza PCR pre hepatitídu C: negatívny, pozitívny, transkript

Hepatitída C je vírusové ochorenie pečene spôsobené flavivirusom HCV (z anglického slova vírus hepatitídy C), ktorého štruktúra obsahuje molekulu ribonukleovej kyseliny (RNA). RNA nesie genetický kód vírusu. Jeho prítomnosť umožňuje analýzu PCR pre hepatitídu C.

Nebezpečenstvo HCV pre osobu spočíva v tom, že tzv. Sérologické okno (čas medzi infekciou a prejavom reakcie imunitného systému) môže byť dosť dlhé - od niekoľkých týždňov až po šesť mesiacov.

Neinfikuje infekciu a začne liečbu včas.

V závislosti od jednotlivých charakteristík organizmu sa nosič HCV môže prejaviť v akútnej forme, rovnako ako chronické ochorenie, ktoré bude vyžadovať dlhú a nákladnú liečbu. Keď sa detegujú protilátky proti HCV, vykoná sa séria laboratórnych testov, vrátane PCR pre hepatitídu C. Tento test sa uskutočňuje pre všetkých ľudí, u ktorých sa našli krvné protilátky proti HCV.

Čo je analýza PCR?

Laboratórna analýza PCR pre hepatitídu C - štúdium biologického materiálu s cieľom zistiť prítomnosť flavavírusu.

Polymerázová reťazová reakcia (ako skratka znamená) ukazuje kvantitatívnu hodnotu vírusovej lézie tela, jeho kvalitatívne charakteristiky, ako aj genotyp vírusu obsahujúceho RNA.

Na ich základe a na základe ďalších analýz sa určuje spôsob a trvanie liečby, ako aj epidemiologický faktor (stupeň rizika prenosu na iného nosiča).

Čo je analýza hepatitídy C RNA?

Hepatitída C PCR sa tiež nazýva RNA analýza (HCV RNA), pretože Flavavírus obsahuje časticu RNA s veľkosťou viriónu 30-60 nm. Jedným zo znakov tohto mikroorganizmu je vysoká tendencia mutácií.

Každý z poddruhov (genotypov) vírusu má iný odpor, ktorý spôsobuje rôzne spôsoby liečby a povahu ďalšej prognózy pre pacienta.

Biologický materiál (žilová krv) sa podáva na prázdny žalúdok a spravidla sa testuje pomocou metódy Real-Time PCR (vysoko citlivá diagnostika v reálnom čase s nižším detekčným limitom 15 IU / ml pomocou uzavretých automatizovaných systémov).

Existujú aj ďalšie testy, napríklad COBAS AMPLICOR s citlivosťou 50-100 IU / ml. Pri akejkoľvek laboratórnej skúške je dôležitá prah citlivosti, t.j. schopnosť činidla detegovať minimálnu koncentráciu vírusu v biologickom materiáli.

Druhy analýzy hepatitídy C pomocou PCR

Hepatitída C zahŕňa tri dôležité komponenty:

  • kvalitatívna analýza;
  • kvantitatívna analýza;
  • genotypu.

Tieto testy umožňujú určiť povahu virémie, ako aj genetické vlastnosti patogénu. V závislosti od citlivosti diagnostického systému sa štúdia uskutočňuje raz a niekedy sa vykoná druhá skúška s citlivejšou činidlom na potvrdenie alebo spresnenie výsledkov.

Vysoko kvalitná PCR hepatitídy C

Kvalitatívna PCR analýza hepatitídy C je ďalším bežným názvom pre analýzu polymerázovej reťazovej reakcie. Štandardná citlivosť testu, ktorá umožňuje zistiť prítomnosť vírusových lézií, je v rozmedzí 10-500 IU / ml.

Z negatívnej analýzy PCR pre hepatitídu C vyplýva, že koncentrácia vírusu v krvi pacienta je nižšia ako prah citlivosti diagnostického systému.

Ak vysokokvalitná PCR poskytla odpoveď "nezistená", potom je pre následnú liečbu dôležité zistiť prah citlivosti činidla.

Proteínové frakcie na vírus flava sa objavujú oveľa neskôr.

Hepatitída C Kvantitatívna PCR

PCR kvantitatívna hepatitída C je indikátorom vírusovej záťaže, ktorá odráža hladinu RNA koncentrácie flavavírusu v tele. Toto je ukazovateľ, ktorý ukazuje, koľko fragmentov vírusovej RNA je obsiahnutých na kubický centimeter krvi. Výsledky PCR RNA hepatitídy C v kvantitatívnom teste v konvenčnom systéme sú uvedené v medzinárodných jednotkách na mililiter (IU / ml) a môžu sa zaznamenať rôznymi spôsobmi, napríklad 1,7 milióna alebo 1,700,000 IU / ml.

Kvantitatívna PCR diagnostika hepatitídy C je predpísaná pacientom pred začiatkom antivírusovej liečby av 12. týždni liečby s cieľom vyhodnotiť výsledky zvolenej metódy liečby HCV. Vírusová záťaž umožňuje určiť tri dôležité indikátory choroby:

  • infekčnosť, t.j. stupeň rizika prenosu vírusu z jedného nosiča na druhý (čím je vyššia koncentrácia fLA-vírusovej RNA, tým vyššia je pravdepodobnosť infekcie inej osoby, napríklad prostredníctvom sexuálneho kontaktu);
  • metóda a účinnosť liečby;
  • trvanie a prognóza antivírusovej terapie (čím je vírusová záťaž vyššia, tým dlhšie trvá liečba).

Kvantitatívna PCR diagnostika hepatitídy C závisí od typu laboratórneho testu a prahu jeho citlivosti. Dolná hranica normy sa považuje za indikátor až do 600 000 IU / ml, priemerná hodnota je v rozmedzí 600 000-700 000 IU / ml. Výsledky 800 000 IU / ml a vyššie sa považujú za vysoké hladiny vírusu obsahujúceho RNA.

genotypu

Vzhľadom na vysokú mutačnú aktivitu HCV v prírode je pri testovaní dôležité identifikovať, ktorý vírusový genotyp je v krvi pacienta. Celkovo bolo na planéte zaznamenaných 11 genotypov vírusu hepatitídy C, ktoré zahŕňajú mnoho poddruhov (podtypov). Na území Ruskej federácie rozdelili 1,2 a 3.

Hepatitída C PCR RNA spolu s genotypizáciou je veľmi dôležitou súčasťou analýzy umožňuje lekárovi určiť rezistenciu (rezistenciu) vírusu, vybrať vhodné lieky a predpísať priebeh liečby.

Genotypovanie vám tiež umožňuje nepriamo určiť stav pečene. Napríklad genotyp 3 HCV je často sprevádzaný steatózou, v ktorej sa tuk nahromadí v bunkách orgánu.

Krvný test na PCR pre hepatitídu C by mal vytvoriť číslo, ktoré určuje genotyp. Laboratórne odpovede môžu povedať "nešifrované" - a to znamená, že vírus je v ľudskej krvi, ktorý testovací systém nezistil. To môže naznačovať, že genotyp nie je pre danú zemepisnú oblasť typický. V tomto prípade by ste mali zopakovať analýzu s vyššou citlivosťou diagnostického systému.

Dekódovanie analýzy PCR pre hepatitídu C

Test na kvantitatívny dešifrovanie PCR hepatitídy C môže byť založený na vyššie uvedených údajoch. Pri získaní výsledkov laboratórnych testov sa zvyčajne uvádzajú tieto údaje:

  • "Zistené" / "nenájdené" (vysoko kvalitná PCR pre hepatitídu C);
  • počet frakcií obsahujúcich RNA, napríklad 831,680 ME / ml (kvantitatívna PCR analýza);
  • číslo, ktoré určuje genotyp HCV, napríklad - 1, 2, 3, 4;
  • Názov testu je najčastejšie v reálnom čase.

Najdôležitejšie pri dešifrovaní analýzy PCR pre hepatitídu C je druhý odsek, ktorý ukazuje vírusovú záťaž, ktorá určuje prognózu, spôsob a trvanie liečby.

Ak je test PCR na hepatitídu C negatívny a test ELISA je pozitívny - čo to znamená?

Na dešifrovanie laboratórnych testov je dôležité kontaktovať odborníka na hepatológiu alebo špecialistu na infekčné ochorenia, ktorý vysvetlí informácie získané v súlade s typom diagnostického systému a jeho prahovou citlivosťou. V lekárskej praxi existuje veľa údajov o krvných testoch, ktoré môžu zavádzať osobu bez lekárskej výchovy.

Ak je napríklad test na hepatitídu C negatívny a test ELISA je pozitívny, môže to znamenať, že v krvi pacienta nie je HCV v súčasnosti, ale predtým trpí akútnou formou hepatitídy C. Predpokladá sa, že pozitívny enzýmový imunosorbent (ELISA) ukazuje, že v krvi sú protilátky, ktoré boli vyrobené po invázii vírusu v minulosti. V modernej medicínskej praxi sa však analýza ELISA považuje za nedostatočne spoľahlivú a často poskytuje atypické výsledky, takže lekári ju používajú ako primárne vyšetrenie. Pri diagnostikovaní ochorenia sa špecialisti riadia presne pomocou PCR testov.

Užitočné video

Nasledujúce video dáva veľmi podrobný a zaujímavý opis podstaty metódy PCR, ako je vykonaná analýza:

záver

Na analýzu PCR pre hepatitídu C sa zvyčajne užíva venózna krv. Najčastejšie dochádza k dvojnásobnému príjmu biologického materiálu - na test ELISA a priamo na test PCR. Pre správne výsledky testov sa vyžaduje súlad so základnými pravidlami pre laboratórne odbery vzoriek biologického materiálu:

  • krv na analýzu sa podáva v prvej polovici dňa na prázdny žalúdok;
  • medzi odberom krvi a krvou by mala trvať najmenej 8 hodín;
  • alkohol a vyprážané potraviny by tiež mali byť vylúčené pred vykonaním testu;
  • počas dňa pred darovaním krvi je potrebné vyhnúť sa vysokej telesnej námahe.

Výsledky krvného testu sú zvyčajne pripravené na nasledujúci deň.

PCR analýza pre hepatitídu C

Na diagnostiku "chronickej vírusovej hepatitídy C (CVHS)" sa vyžaduje komplexné vyšetrenie osoby, ktoré zahŕňa klinické, laboratórne a inštrumentálne štúdie. Dôležitým z hľadiska diagnózy pre správnu diagnózu je metóda PCR - polymerázová reťazová reakcia.

Čo ukazuje táto analýza a prečo je to potrebné?

Táto laboratórna metóda deteguje RNA vírusu hepatitídy C v ľudskej krvi. Spolu s enzýmom viazaným imunosorbentným testom (ELISA) na protilátky proti vírusu sa PCR používa na stanovenie diagnózy CVHC a genotypu jej patogénu. Tento výskum je jednou z najnovších metód laboratórnej diagnostiky. Jeho spoľahlivosť na CVHS presahuje 97%, čo sa považuje za veľmi dobrý ukazovateľ pre výskum.

Existujú tri krvné PCR testy pre CVHC: kvalitatívne, kvantitatívne a vírusové genotypizácie. Prvá štúdia (kvalitatívna analýza) vírusu ho deteguje v krvi a preto sa používa iba na diagnostiku.

Druhá (kvantitatívna) štúdia určuje stupeň vírusovej záťaže na tele, a preto sa používa na monitorovanie účinnosti liečby.

Tretia PCR (genotypizácia) objasňuje diagnózu, ktorá stanovuje genotyp vírusu, čo je veľmi dôležité pre určenie správnej antivírusovej liečby.

Podstatou technológie polymerázovej reťazovej reakcie je použitie enzýmov, ktoré množia genetický materiál patogénu v biomateriáli. V procese takejto replikácie sa trubica s krvou niekoľkokrát zohreje a ochladí na teplotu potrebnú na urýchlenie enzymatickej reakcie. V dôsledku týchto manipulácií množstvo vírusového genómu sa mnohonásobne zvyšuje, čo umožňuje jeho detekciu aj s minimálnym množstvom.

Diagnostika PCR má veľa výhod oproti iným laboratórnym testom:

  • vysoká citlivosť - 97-98%;
  • zaručená analytická špecifickosť (odhaľuje presne patogén, ktorý chcete nájsť, a nie jeho súvisiaci kmeň);
  • rýchlosť vedenia (trvá maximálne 2 dni, kým sa nedosiahne záver).

Tri typy PCR testov

Vysokokvalitná analýza PCR sa priraďuje všetkým pacientom, u ktorých analýza ELISA detegovala protilátky proti vírusu HVGS. Po vykonaní vysokokvalitnej PCR sa dajú získať dve možnosti odpovede: "RNA je detegovaná" alebo "RNA nie je detegovaná". Na zistenie minimálneho množstva vírusu v krvi sú potrebné testovacie systémy s citlivosťou najmenej 50 IU / ml. Ak je koncentrácia vírusu v krvi pacienta menšia, než diagnostika môže určiť, výsledok štúdie môže byť falošne negatívny. Aby sa zabránilo takejto diagnostickej chybe, laboratóriá vykonávajúce diagnostiku PCR by mali byť vybavené veľmi citlivými testovacími systémami. V laboratóriu "Invitro" sa používajú napríklad testy s citlivosťou 15 IU / ml. Pracovníci laboratória sú povinní poskytnúť informácie o citlivosti testov pacientom a lekárom na základe ich prvej žiadosti.

Kvantitatívna analýza PCR určuje stupeň virémie, tj koncentráciu patogénu v krvi, vírusovú záťaž. Výsledok tejto štúdie, na rozdiel od vysoko kvalitnej PCR, sa vyjadruje počtom, napríklad 2 × 10 x 6 IU / ml, čo znamená 2 milióny medzinárodných jednotiek v 1 ml krvi. Niektoré laboratóriá používajú iný indikátor - počet kópií / ml. Tieto dva ukazovatele sa ľahko konvertujú: 1 medzinárodná jednotka sa rovná 4 kópiám RNA. Takže 2 x 10 x 6 IU / ml znamená, že 8 x 10 x 6 kópií vírusovej RNA v 1 ml, t.j. 8 miliónov kópií v 1 ml krvi.

Genotypizácia je definícia jedného zo šiestich genotypov vírusu. Klinický obraz, rýchlosť vývoja komplikácií pečene a prognóza budúceho života pacienta závisia od genotypu pôvodcu. Genotyp vírusu je veľmi dôležitý už v štádiu diagnostiky, pretože kombinácia liekov a trvanie terapeutického kurzu, ktorý má pacient priradiť, závisí od jeho správneho stanovenia.

Aj tento zdanlivo "dokonalý" laboratórny výskum má svoje nevýhody:

  • štúdia replikuje genetický materiál všetkých patogénov, dokonca aj neživých, čo môže skresľovať výsledok. Preto s cieľom monitorovať účinnosť pomocou PCR sa vykoná reanalýza nie skôr ako 2 mesiace po predchádzajúcej, takže mŕtve vírusy môžu "opustiť" telo pacienta;
  • časť vírusového genómu, ktorá sa určuje pomocou testovacích systémov, môže byť teoreticky prítomná v iných vírusoch alebo mikroorganizmoch, takže existuje možnosť falošnej pozitívnej odpovede;
  • vírusy sa rýchlo menia. Niekedy je rýchlosť a rozsah vírusovej mutácie taká vysoká, že testovací systém zastaví chytenie svojho genómu. Výsledkom je falošný negatívny výsledok.

Na vyrovnanie týchto nedostatkov vedú výrobcovia laboratórnych testovacích systémov pre diagnostiku PCR stále testy vrátane krížových reakcií a citlivosti na konkrétny genotyp vírusu.

Ako urobiť PCR test na hepatitídu C?

Na to, aby bola skúška PCR spoľahlivá, je potrebné dôsledne dodržiavať pravidlá prípravy na jej správanie:

  • výskum sa uskutočňuje na prázdny žalúdok (glukóza, tuky, minerály, ktoré vstupujú do krvi z potravy, môžu ovplyvniť rýchlosť a kvalitu enzýmovej reakcie);
  • medzera medzi posledným jedlom a odberom krvi na analýzu by mala byť aspoň 8 hodín;
  • v predvečer štúdie je zakázané užívať alkohol a konzumovať tučné jedlá, ktorých doba eliminácie je dlhá;
  • deň pred odchodom do laboratória by sa malo vyhnúť silnému fyzickému a emočnému stresu;
  • kým sa neodporúča fajčiť odber vzoriek krvi.

Aby sa zabránilo vzniku falošných záverov, údajný pacient musí prísť do laboratória o niečo skôr, než krv bude prijatá. Trvá 15-20 minút, kým človek zachyti dych, upokojí. Adrenalín, ktorý je prítomný v krvi po rýchlej prechádzke, môže mať vplyv na výsledok vyšetrenia.

Ak sa u pacienta, ktorý sa odvoláva na analýzu, vezme nejaké lieky, musí o tom informovať lekára. Je možné, že niektoré z nich budú musieť byť odmietnuté po určitý čas (ak je to možné).

Výsledok analýzy PCR pre hepatitídu C

Dekódovanie výsledkov laboratórneho lekára laboratória, ktorý vykonal analýzu. Dekódovanie je definícia odchýlky výsledku získaného z normy. Rýchlosť ukazovateľov stanovuje priamo výrobca skúšobného systému, ktorý používa laboratórium na diagnostiku. Preto nie je prekvapujúce, že v niektorých laboratóriách je vírusová záťaž stanovená v IU / ml a v iných v kópiách / ml.

Po prijatí záveru je potrebné, aby bolo možné ho správne interpretovať. Ošetrenie výsledkov štúdie by malo byť vykonané ošetrujúcim lekárom pacienta s hepatitídou C. Iba po objektívnom, inštrumentálnom a laboratórnom vyšetrení pacienta môže lekár dostať dostatočné množstvo údajov na správnu interpretáciu získaných výsledkov PCR.

Hodnotenie kvalitatívnej analýzy spravidla nespôsobuje ťažkosti ani u pacientov. Výsledok môže byť iba jeden: "zistené" alebo "nezistené". V tomto prípade je druhá z nich normou.

Ukazovatele kvantitatívnej analýzy je ťažšie interpretovať. Zobrazuje stupeň vírusovej záťaže pacienta. Dokonca ani medzi hepatológmi neexistuje konsenzus o tom, ako liečiť detekovanú vírusu. Väčšina lekárov má sklon veriť, že by sa malo zvážiť vysoké zaťaženie viac ako 8 × 10 * 5 IU / ml. Zaťaženie s hodnotou viac ako 1 × 10 * 7 IU / ml sa považuje za veľmi vysoké, zatiaľ čo nízke zaťaženie je menej ako 4 × 10 * 5 IU / ml.

Stupeň vírusovej záťaže naznačuje virulenciu (agresivitu) vírusu: čím väčšie je jeho množstvo v krvi, tým rýchlejšie sa môžu vyvinúť komplikácie pečene. Vysoká koncentrácia vírusu v krvi tehotnej ženy zvyšuje pravdepodobnosť jej penetrácie cez hemato-placentárnu bariéru k plodu. Viremia ovplyvňuje aj účinnosť liečby: pri nízkych počtoch je účinnosť terapie vyššia ako u vysokých.

Aby sme boli presvedčení o správnosti analýzy PCR pre hepatitídu C, je potrebné uprednostniť iba tie laboratóriá, ktoré pracovali dobre. Cenová politika v tomto prípade by nemala zohrávať primárnu úlohu.


Predchádzajúci Článok

Tubus (slepý snímanie) žlčníka

Nasledujúci Článok

3-stupňová rakovina čreva

Viac Články O Pečeň

Cholecystitída

Koľko žije s rakovinou pečene?

Zanechajte komentár 3,858Rakovina sa považuje za najnebezpečnejšiu rakovinu pre ľudský život. Prežitie v rakovine pečene závisí od obdobia ochorenia, zložitosti priebehu, histológie novotvaru.
Cholecystitída

Ako liečiť bolesť pečene doma

Ak bola osoba vyšetrená a je si istá, že má bolesť v pečeni, lekár predpíše priebeh liečby. Nie je možné sa tento symptóm rýchlo zbaviť. Bolesť sa zníži, keď sa znižuje procesná aktivita.